[发明专利]一种新的多肽——人嗜碱核蛋白10.78和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人嗜碱核蛋白10.78，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

物的多种不同的蛋白中存在着两种不同的结构，在生物体内参与调节蛋白与序列特异DNA的结合，这两个蛋白结构即是锌指结构基序和基本螺旋-噜噗-螺旋(HLH)结构基序。TFⅢ蛋白是第一个克隆得到的RNA多聚酶Ⅲ转录调节因子，该蛋白的氨基酸序列中含有多个由约30个氨基酸残基组成的锌指结构基序。研究发现，锌指结构基序由多个重复配对的半胱氨酸及组氨酸所组成，具有如下所示的特征性序列片段：C-X_2-4-C-X₁₂-H-X_3-4-H(4,5)；其中X表示任意氨基酸残基；半胱氨酸与组氨酸与锌原子形成配位键，结合锌原子；其它变化的氨基酸残基负责介导蛋白与其它分子的相互作用。一个锌指蛋白中可能含有一个或多个如上所述的锌指基序，这些结构基序在生物体内独立完成自己的生理学功能。在很多情况下，含有锌指结构基序的蛋白与特殊的双链及单链DNA序列相互作用，起着转录调节因子的作用。现有研究发现，锌指结构基序不仅在一些组织的基因表达过程中起重要的调节作用，其在生物体的生长、发育调节过程亦起着非常关键的作用。

近年的研究发现，在高等生物体内还存在着一类蛋白，该类蛋白在肌肉及胚胎早期发育过程中起着重要的调节作用，其组成了一独立的蛋白家族即嗜碱核蛋白家族。该类蛋白为角质细胞蛋白，其三分之二的成员的蛋白序列C末端含有三个保守的锌指结构基序，这些锌指基序在蛋白的作用活性过程中起重要的调控作用。该蛋白家族的成员多在细胞核中表达，其在成体终末分化及角质组织发育过程中起重要的调控作用，该类蛋白的突变或表达异常将导致生物体相关组织如肌肉、角质等组织的生长及发育异常。

1992年，Hung等人从人中克隆得到了一新的嗜碱核蛋白，该蛋白的氨基酸序列的C末端构成一α-螺旋结构及三个相邻的锌指结构基序，其锌指结构基序中还含有一由六个氨基酸残基组成的序列片段。该蛋白亦在细胞核内高表达，其结构基序的突变或表达异常将导致蛋白在体内的作用异常，进而引发各种相关的代谢及发育紊乱性疾病[Hung Tseng,Howard Green et al.,1992,Prog Natl AcadSci USA,89:10311-10315]。该蛋白在生物体内通常与一些胚胎发育紊乱性疾病、肌肉及角质组织发育异常及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1 024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人嗜碱核蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人嗜碱核蛋白10.78。

由于如上所述人嗜碱核蛋白10.78蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人嗜碱核蛋白10.78蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人嗜碱核蛋白10.78蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人嗜碱核蛋白10.78以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人嗜碱核蛋白10.78的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人嗜碱核蛋白10.78的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人嗜碱核蛋白10.78的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人嗜碱核蛋白10.78的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人嗜碱核蛋白10.78的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人嗜碱核蛋白10.78异常相关的疾病的方法。