[发明专利]一种新的多肽——酸性磷酸酶14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--酸性磷酸酶14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

酸性磷酸酶(即正磷酯单酯磷酸水解酶)在生物体内催化磷酸酯单酯的水解；在一些条件下，其还催化磷酸酯与乙醇间的磷酰基转移。酸性磷酸酶在动物及植物体内均存在，它们可分为三种不同的类型：两种为低分子量酸性磷酸酶；第三种为高分子量酸性磷酸酶[Gunter Schneider,Ylva Lindqvist et al.,1993,TheEMBO Journal,12:2609-2615]。高分子量酸性磷酸酶在人的溶酶体、前列腺、乳房及肝组织中均存在。研究发现，高分子量的酸性磷酸酶中有一家族的成员，其催化活性的完成需通过亲和组氨酸的参与，因而又称之为组氨酸磷酸酶家族[Kirill Ostanin,Etti H.Harms et al.,1992,J.Biol.Chem.,267:22830-22836]。

酸性磷酸酶在低PH值(即酸性环境)条件下达到最适状态。研究发现，从原核生物到真核生物，组氨酸磷酸酶家族中的成员均含有两个相似的序列片段，每一序列片段均含有一高度保守的组氨酸残基。这两个组氨酸参与酶的催化机制。第一个组氨酸存在于蛋白的N末端，其在生物体为磷酸基团的亲和受体，形成一磷酸化中心区域，负责转运磷酸基团；而第二个组氨酸存在于蛋白的C末端，其在生物体内作为质子的供体。

该酶家族的成员含有如下所示的两个一致性序列片段：一致性序列 1：[LIVM]-X(2)-[LIVMA]-X(2)-[LIVM]-X-R-H-[GN]-X-R-X-[PAS]；一致性序列 2：[LIVMF]-X-[LIVMFAG]-X(2)-[STAGI]-H-D-[STANQ]-X-[LIVM]-X

(2)-[LIVMFY]-X(2)-[STA](其中H为活性位点氨基酸残基)；研究发现，第一个一致性序列片段在所有该家族中的成员中均存在；而第二个序列片段除在鼠酸性磷酸酶中由酪氨酸替代组氨酸外，其余该家族的成员均含有这一片段。这两个序列片段为酶发挥正常生理学功能的活性中心，参与了众多生物代谢过程，其表达异常将直接影响生物体内的正常脂类代谢，从而引发各种相关的代谢紊乱症，如脂类代谢紊乱症等。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与酸性磷酸酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为酸性磷酸酶14。

由于如上所述酸性磷酸酶14蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的酸性磷酸酶14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新酸性磷酸酶14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--酸性磷酸酶14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码酸性磷酸酶14的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码酸性磷酸酶14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产酸性磷酸酶14的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--酸性磷酸酶14的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--酸性磷酸酶14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与酸性磷酸酶14异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；