[发明专利]一种新的多肽——RasGTP酶激活蛋白10和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--Ras GTP酶激活蛋白10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人类的基因中有一些调控正常细胞的生长。Ras基因是其中的一个亚群，至少包括三个成员，N-ras,H-ras，以及K-ras2。Ras的变异形式，被称为抑癌基因，它被认为是癌症的病原体。Ras的正常细胞基因及抑癌基因都编码化学相关的蛋白，总称为ras p21蛋白。无论是正常的ras p21与抑癌基因ras p21蛋白，都与核苷酸，GTP及GDP结合，并把GTP缓慢水解为GDP。这种内在的GTP酶活性由细胞因子GAP刺激，其全称为GTP酶激活蛋白，但它对抑癌基因变异相关的GTP酶活性不起作用。GAP是一种胞质蛋白，可从胞质转入质膜与p21相互作用。由于它是活性ras的GTP结合形式，因而这些蛋白被称为ras的负调节物。

GAP家族成员都是分子量较大的蛋白(从765个残基至3079个残基)，但相同的保守序列是一个有限的区域(约有250个残基)，被称为是“催化域”或rasGAP域。该区域中最为保守的区域是一段含有15个残基的基序，它是该蛋白家族的特征序列：[GSN]-x-[LIVMF]-[FY]-[LIVMFY]-R-[LIVMFY](2)-[GACN]-P-[AV]-[LIV](2)-[SGAN]-P。

活性ras蛋白与细胞增殖直接相关。Ras抑癌基因与各种肿瘤生长有关，并涉及10-40％最为常见的人类癌症，例如膀胱癌，结肠癌，肾癌，肝癌，肺癌，卵巢癌，胰腺癌以及胃癌。该基因还与淋巴及骨髓造血肿瘤，间充质起点瘤相关。本发明包括上述肽段的多肽，该多肽的拮抗剂，抑制剂以及激动剂可用于诊断，预防及治疗癌症，尤其是探测正常或抑癌基因ras p21的过度表达并治疗由ras抑癌基因引起的癌症。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与Ras GTP酶激活蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为Ras GTP酶激活蛋白10。

由于如上所述Ras GTP酶激活蛋白10蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的Ras GTP酶激活蛋白10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新Ras GTP酶激活蛋白10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--Ras GTP酶激活蛋白10以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码Ras GTP酶激活蛋白10的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码Ras GTP酶激活蛋白10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产Ras GTP酶激活蛋白10的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--Ras GTP酶激活蛋白10的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--Ras GTP酶激活蛋白10的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与Ras GTP酶激活蛋白10异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。