[发明专利]一种新的多肽——人利尿钠肽受体11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人利尿钠肽受体11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

利尿钠肽是一类参与体液调节和保持电解质稳态的激素，这类激素作为一个第二信使刺激细胞内环鸟苷酸的产生。

现在，已有三种不同的利尿钠肽受体被识别。其中的两种，ANP-A和ANP-B介导生物行为：ANP-A对心纳素(ANP)特异，ANP-B似乎更能被脑钠素(BNP)有效地刺激。由于这两种受体在配体特异性和组织分配中有明显差异，我们推测ANP和它的受体ANP-A、BNP和它的受体ANP-B表现了两种截然不同的利尿钠肽受体的调节系统。第三种受体ANP-C是一种低分子量受体，编码这种受体的cDNA已经被克隆，它的mRNA缺少鸟苷酸环化酶序列，因此推测ANP-C的功能是从循环系统中清除利尿钠肽，也就是说，它负责调整利尿钠肽的血浆水平，但它对信号的转导不起作用。

ANP-A和ANP-B为血浆膜结合蛋白，共有以下拓扑结构：一个是N-末端胞外域，作为配体结合区；另一个是跨膜结构域，包含着一个大的细胞质C-末端区，这个C-末端区又可再分为两个区域：对正常细胞很重要的类激酶蛋白域和鸟苷酸环化酶接触反应域。ANP-C的结构是不同的：和ANP-A和ANP-B一样，它具有一个胞外配体结合域和一个跨膜结构域，但它的胞质区特别短，仅包含了97个氨基酸，而且，在ANP-C胞外区发现的5个半胱胺酸残基在哺乳动物的酶中是十分保守的。这三种受体结构的共有区模式如下：G-P-x-C-x-Y-x-A-A-x-V-x-R-x(3)-H-W。

本发明的多肽被推断鉴定为人利尿钠肽受体11。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人利尿钠肽受体的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人利尿钠肽受体11。

由于如上所述人利尿钠肽受体11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人利尿钠肽受体11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人利尿钠肽受体11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人利尿钠肽受体11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人利尿钠肽受体11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人利尿钠肽受体11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人利尿钠肽受体11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人利尿钠肽受体11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人利尿钠肽受体11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人利尿钠肽受体11异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中1888-2181位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2273位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。