[发明专利]一种新的多肽——人DPB甲基转移酶16和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人DPB甲基转移酶16，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

甲基化作用在生物，特别是高等真核生物的限制修饰系统中有重要的生物学意义。脊椎动物和高等植物的DNA中，有些胞嘧啶碱基在5′碳附着一个甲基团，胞嘧啶残基带有甲基团的组分在各类不同的的动物体内占约0.7-0.8％之间，且在同一种动物内因组织而异。甲基团的添加是由于甲基转移酶的催化作用。

总体上说，DNA的甲基化对高等真核细胞中的一些基因的调节机制有作用，去甲基化和甲基化决定着转录的激活和失活。

此外，许多小分子如神经传导因子的降解都需要甲基转移酶的参与。(Kagan，R.M.and C1arke，S.(1994)Arch.Biochem.Biophys.31O：417-427)

病理学的研究显示，肿瘤和一些其他疾病的发生与甲基的共价修饰有关。(G10ria，L.et al.(1996)Cancer 78：2300-2306)真核生物胞嘧啶的过度甲基化会影响转录活性。(Turker，M.S.and Bestor，T.H.(1997)Mutat.Res.386：119-130)在感染的细胞中，过度甲基化的病毒DNA的转化效率要高于甲基化不足或半甲基化的DNA。(willis，D.B.et al.(1989)Cell.Biophys.15：97-111)

本发明的多肽被推断为人的二羟聚异戊烯安息香酸盐甲基转移酶，称为人DPB甲基转移酶16(HDPBMTl6)，这是氨基酸同源比较的结果。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人DPB甲基转移酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人DPB甲基转移酶16。

由于如上所述人DPB甲基转移酶16蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人DPB甲基转移酶16蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人DPB甲基转移酶16蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人DPB甲基转移酶16以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DPB甲基转移酶16的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DPB甲基转移酶16的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人DPB甲基转移酶16的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人DPB甲基转移酶16的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人DPB甲基转移酶16的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人DPB甲基转移酶16异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含；具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1197-1622位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1716位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。