[发明专利]一种新的多肽——人细胞色素bcl复合物核心蛋白II10.23和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

粒体呼吸链的一种多亚基酶，它催化电子从泛醌转移至高铁细胞色素c，其间伴随能量转换。哺乳动物的细胞色素bcl复合物由10-11个亚基构成：核心蛋白Ⅰ和Ⅱ，细胞色素b，细胞色素cl，铁-硫蛋白，泛醌结合蛋白以及四至五个低分子量亚基。细胞色素b多肽由线粒体基因组编码，而其他成分则由核基因组编码。其中的两个核心蛋白不具有氧化还原中心，也不直接参与酶的电子转移反应；然而它们存在于各种不同系统发生的真核物种的所有线粒体色素bcl复合物中，它们在能量转换，调节酶反应以及把其他亚基装配成功能性复合物的过程中起重要作用(Hatefi,Y.(1985)Annu.Rev.Biochem.54,1015-1069)。

多数线粒体蛋白是核基因产物并作为含有一个NH₂-端延伸的较大前体合成。这些前体被输入线粒体，加工成成熟的形式，然后到达其适当的位置。人的细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ前体的前序列由14个氨基酸残基构成，可作为一个输入信号行使功能，这一前序列中具有碱性氨基酸与含羟基基团的氨基酸，但没有酸性氨基酸。根据细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ的氨基酸序列亲水分布图分析，该蛋白具有亲水性特质，位于细胞膜基质侧的含水相，且该蛋白不具有足够长的亲水片段跨越膜，因而它不是一种膜整合蛋白，结构中有些短的亲水区域把蛋白固定在膜上，并与细胞色素bcl复合物的其他亚基相连。核心蛋白Ⅱ通过保持氧化还原活性亚基的正确定位，从而维持了细胞色素bcl复合物的催化功能。细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ的缺失或异常会引起细胞色素bcl复合物的功能丧失并引发一系列与能量代谢有关的疾病(Yoshitaka Hosokawa,Hiroshi Suzuki,The Journal of Biological Chemistry264(23):13483-13488(1989))。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23。

由于如上所述人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人细胞色素bcl复合物核心蛋白Ⅱ10.23异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。