[发明专利]一种新的多肽——核糖体s19e蛋白12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--核糖体s19e蛋白12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

核糖体是蛋白合成的加工场所，其在生物体内不断地沿着mRNA移动，以极快的速度合成肽链。核糖体蛋白按照一定的顺序与rRNA结合以及蛋白质之间的相互结合，组装成两个核糖体亚基---一个大亚基和一个小亚基，其中大亚基约是小亚基的两倍，而rRNA直接参与mRNA和tRNA的结合。核糖体和它的辅助因子结合在一起，拥有蛋白合成各阶段所需要的全部酶活性。这些酶活性只有在核糖体整体结构存在的情况下才具备，核糖体蛋白质和rRNA都不能单独参与蛋白合成反应。

不论是真核生物还是原核生物，其核糖体都由大小两个亚基组成，各种核糖体蛋白质在大小亚基内都有一定的位置，rRNA是其中的骨架。有的核糖体蛋白直接与rRNA结合，这些蛋白与rRNA结合后改变了rRNA的构象，从而使另一些蛋白再与rRNA结合，是维持核糖体构象的重要组成成分；而有些核糖体蛋白不直接与rRNA结合，而是结合在其他蛋白质上，这些蛋白在生物体内与其他蛋白协同作用，使核糖体发挥正常的生理功能。所有的核糖体蛋白构成了一个独立的蛋白家族，即核糖体蛋白家族。

核糖体蛋白S19e为核糖体小亚基的组成成分，在古细菌及真核生物的核糖体装配中，均含有这一核糖体蛋白。所有不同来源的S19e蛋白均含有高度的序列相似性。这些蛋白均为核糖体蛋白家族的成员，且均由143-155个氨基酸残基组成。研究发现，核糖体蛋白S19e在核糖体装配过程中直接与rRNA的特异区域结合，其在生物体染色质消减过程中起重要调节作用。染色质消减是生物体对不同基因表达的一种调节方式，通过染色质消减来调节体细胞与胚胎细胞中的DNA的不同含量及一些基因的表达[Etter A.,Aboutanos M.et al.,1991,Proc NatlAcad Sci U.S.A.,88:1593-1596]。因而，该蛋白在生物体遗传信息的表达过程中起着重要的作用。

所有的核糖体S19e蛋白的中心区域均含有如下所示的一致性序列片段：

G-G-G-X(2)-[GSA]-Q-X(2)-[SA]-X(3)-[GSA]-X-[GSTAV]-[KR]-[GSAL]-[LIF]；

该序列片段是蛋白与rRNA及其他核糖体组成蛋白结合，共同维持核糖体活性构象的中心区域并发挥正常生理学功能的中心区域。该片段的突变将导致核糖体S19e蛋白的表达异常，从而不能正常地调控遗传信息的表达，即影响生物体内各种相关的代谢途径的正常进行。该蛋白的表达异常通常会导致蛋白翻译水平的表达调控异常，从而引发各种相关的代谢紊乱症、免疫系统疾病、各种肿瘤及癌症的发生等。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与核糖体s19e蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为核糖体s19e蛋白12。

由于如上所述核糖体s19e蛋白12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的核糖体s19e蛋白12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新核糖体s19e蛋白12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--核糖体s19e蛋白12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码核糖体s19e蛋白12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码核糖体s19e蛋白12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产核糖体s19e蛋白12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--核糖体s19e蛋白12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--核糖体s19e蛋白12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。