[发明专利]一种新的多肽——人latexin蛋白12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人latexin蛋白12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

负责转录5sRNA,tRNA和部分snRNA基因的RNA聚合酶3需要3个转录因子：TF3A,TF3B和TF3C，其中TF3A由344个氨基酸组成(MW=40KD),N端结构域负责与DNA结合，C端结构域促进转录活性，TF3A N端与DNA结合的结构域由9个有规则的重复单位构成，每个单位有30个氨基酸残基，其中一对半胱氨酸和议对组氨酸与锌离子形成配位键，9个重复单位形成9个手指状结构，构成一个具有共同祖先的家族，负责与DNA大沟结合，可以得到办胱氨酸在其中的位置是C-X(2)-C-X(9to39)-C-X(1to3)-H-X(2to3)-C-X(2)-C-X(4to48)-C-X(2)-C-致序列：C-X-H-X-(LIVMFY)-C-X(2)-C-(LIVMYA)

通过cDNA文库得制备，我们可以发现隔离基因，它在小鼠生精细胞中被诱导表达，其中之一基因是编码带有有锌指结构的蛋白，在精巢中这种基因的转录产物没有被发现。Nothern分析表明sperizin基因仅仅在精子周围表达，sperizin基因无内含子。

一种新的特异基因，编码一种锌指蛋白，在普拉德-韦利斯综合症的临界区逆转录。我们记录的具有复杂结构的在15号染色体q11-q13处编码2种基因，分别是ZNF127和ZNF127AS,ZNF127基因编码一种带有锌指的环状(C3HC4)结构的蛋白质，和具有多个C3HC4锌指结构的motifs，研究者逐渐地注意到天花主要病毒的某种蛋白质，天花病原体。这些motifs在ZNF127发挥功能中可能是作为一种RNP(核糖核蛋白)。ZNF127基因的外显子普遍的表达，但所有编码的序列和5｀CpG岛(基因组中富含CpG的单拷贝非甲基化基因座)交接在第2条基因后，ZNF127AS是从带有不同转录物和表达方式的反义链转录而来的。特异的等位基因分析表明ZNF127仅从父本的等位基因表达，针对这种表达方式，

可以想象ZNF1275｀CpG倒在父本基因中全是非甲基化的基因座，但是在母本等位基因上是甲基化的。对成人精巢进形分析，精子和胎儿的卵母细胞显示甲基化的配子带上了非甲基化的父本病原细胞，近来发现表明ZNF127是部分相同的调控区域会受到普拉德-韦利斯综合症病人的突变体的影响。因此，ZNF127和ZNF127AS是新型基因，它们可能与某些多基因的普拉德-韦利斯综合症的临床特性有关。

目前，RING finger区域的分子得确切结构功能还未能知晓。然而，许多可能性的功能有了一定的线索。RING-containing protein是与DNA特异结合形成RINGfinger状，这最多是一个大胆的推测。许多早期研究基于这些RING-containing蛋白能结合与细胞DNA(22,26)。然而，RING-finger蛋白结构的定位仅仅是一个人为假想的构造，实际上仅仅只有一个RING蛋白家族的成员：Mel-18(27)，已经表明是与DNA结合的结构域。尽管这些研究是在所有蛋白而不是仅在锌指结构域。此外，许多RING finger成员是在细胞质中，许多是对过氧化物酶体有装配功能，这表明与DNA结合没有关系。有趣的是，许多有RING finger的蛋白，特别是三联体，在细胞中集聚的大分子多蛋白中被发现。在这当中的一个成员是PM1，是形成大的核体所包含得至少5种不同的蛋白(9-11)。在RING or B-box结构域中的突变点导致破坏这些多蛋白复合体(25..,28)。为了确定这些多蛋白复合体得自然结构和RING finger的中心结构还必须作进一步的研究。然而，三联体结构域中，RINGfinger可能作为一个中心钥匙，可以揭开未知蛋白的结构功能。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人latexin蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人latexin蛋白12。