[发明专利]一种新的多肽——PO蛋白12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——PO蛋白12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

PO蛋白是外围神经系统(PNS)髓鞘质的主要结构糖蛋白，对于髓鞘质的结构形成和稳定起着较为重要的作用。PO蛋白通常存在于人、猪、兔、鼠和鸡等哺乳动物中，专一性在外围神经系统髓鞘质Schwann细胞中表达，它是髓鞘质中含量最高的蛋白，属于免疫球蛋白超家族。另外，在一些鱼类中也有发现，但与哺乳动物存在较为明显的差别。

PO蛋白约28kd，包含3个结构区域：(1)N-末端的胞外区域，约125个氨基酸残基，其中的25个氨基酸残基形成一个V型结构；(2)跨膜区域；(3)胞质中的C-末端区域，约含70个氨基酸，其中包括许多带正电的氨基酸残基以及易于磷酸化的丝氨酸残基，是丝氨酸蛋白激酶的底物。在种间，PO较为保守，其典型的保守序列如下：S-[KR]-S-X-K-[AG]-X-[SA]-E-K-K-[STA]-K。N-末端第93位上有一个天冬酰氨，使膜外部分成为带负电的糖链。对PO的二级结构分析显示，整个结包含了7个螺旋区域、11个β-链结构和8个折叠结构。

在外围神经髓鞘质中，PO蛋白的增加与髓鞘质的形成密切相关，在胚胎发育前期，PO蛋白比其它基础蛋白出现得早，不论其胞内部分还是胞外部分，都对髓鞘质结构的形成和保持有重要意义。PO蛋白并不仅仅是一种结构糖蛋白，而且还表现出较为重要的生物学活性，其胞外部分类似于免疫球蛋白的V型结构使PO蛋白发挥着粘附分子的功能。另外还发现，在体内，不管原来PO蛋白的表达状况如何，在受损后的神经再生过程中，PO蛋白起着刺激、促进神经突生长的作用。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与PO蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为PO蛋白12。

由于如上所述PO蛋白12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的PO蛋白12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新PO蛋白12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——PO蛋白12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码PO蛋白12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码PO蛋白12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产PO蛋白12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——PO蛋白12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——PO蛋白12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与PO蛋白12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中388-729位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-900位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。