[发明专利]一种新的多肽——人转录阻抑蛋白CCCTC－结合因子(CTCF)10.23和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

及螺旋-环-螺旋结构特征序列模板的核磷蛋白，这种蛋白参与调控重要的细胞功能，包括细胞周期进程，分化以及细胞凋亡。myc在一些人类癌症中是脱离调控的。要维持c-myc mRNA的水平必须调控转录启动以及转录延伸。有许多信号对c-myc mRNA的启动及延伸产生影响。多数信号通过顺式作用于靠近或位于c-myc基因中的调节性DNA序列而作用，其中有些序列与一些核因子特异性结合。CCCTC-结合因子(CTCF)是上述信号的一种，它是一种11-锌指转录因子(Funabiki，T.，B.L.Kreider，J.N.Ihle.(1994)，Oncogene 9：1575-1581)。

11-锌指转录因子，CCCTC-结合因子(CTCF)是一种主要的，进化保守的，哺乳动物c-myc基因的负调节蛋白，它与鸡，鼠，以及人的c-myc致癌基因中的调控序列(启动子-近端区域)特异性结合。CTCF含有两个可转至异源DNA结合域的转录阻抑蛋白区域，并负调节人的c-myc P2启动子。在主要P2启动子下游也发现有一个在鼠与人c-myc基因中都保守的CTCF结合位点，这一P2启动子所在的序列恰好位于RNA多聚酶II停顿并且释放的区域，CTCF是与该序列结合的主要因子。CTCF锌指与各类哺乳动物不同的结合与它们不同的c-myc启动子序列有关，人的CTCF的3至11个锌指介导CTCF结合至c-myc基因的启动子，是人c-myc基因启动子的负调节蛋白，c-myc基因被CTCF阻抑是由特异性翻译后修饰水平调节的。CTCF的表达异常将会引起与调控重要的细胞功能，包括细胞周期进程，分化以及细胞凋亡有关的癌症等疾病(Galina N.Filippova，SaraFagerlie，Molecular and Cellular Biology，Vol.16，No.6，2802-2813(1996))。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23。

由于如上所述人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人转录阻抑蛋白CCCTC-结合因子(CTCF)10.23异常相关的疾病的方法。