[发明专利]一种新的多肽——Krev－1/rapla结合蛋白KRIT134.87和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

bral cavernous malformations，CCM)是先天的大脑血管畸形，能够引起明显的神经系统异常，包括难以控制的抽搐和直肠、肛门神经失控。常染色体显性的CCM位于染色体7q21-q22上，称为CCM1。KRIT1基因编码krev-1/rapla结合蛋白，与大脑的海绵状畸形密切相关(Labauge，P.，Laberge，S.et al.，1998)。

KRIT1基因的开放阅读框(ORF)分布有12个外显子，分子量超过37.7Kb。在墨西哥-美洲家系中，存在一种突变：KRIT1的外显子6上出现一个单碱基转换区(742 C-T)，单个碱基的转换使得原来的Gln改变为提前出现的终止密码子。这种突变只存在于患病个体中或者是非患病但包含了致病基因单倍体的家族成员中，即为无症状的突变携带者。

KRIT1编码Krev-1/rapla蛋白，这种蛋白很早就已经分离得到，是一种肿瘤遏制 因子，其功能是部分地回复被转换的显性Kirsten恶性毒瘤病毒转换细胞。KRIT1编码Krev-1/rapla蛋白还主要在血管发育中起作用，但在许多组织和器官中都发现有表达，包括在许多器官的小血管中(Tomlinson，F.H.，Houser，O.W.et al.，1994；Maraire，J.N.，Awad，I.A.，1995)。KRIT1在心脏、肌肉等组织中也有微弱的表达，但在许多其它的组织中没有(Rigamonti，D.，Hadley，N.M.et al.，1988；Labauge，P.，Laberge，S.，1998)。

虽然，大脑的海绵状畸形是先天的，但是在临床上表现出来一般是在婴儿出生后的3-5年之后(Gil-Nagel，A.，Wilcox，K.J.et al.，1995；Zabramski，J.M.，Wascher，T.M.，1994；Kondziolka，D.，Lunsford，L.D.，Kestle，J.R.，1995)，因此，许多患有这种疾病的个体在出生早期是正常的。病人非常频繁地产生难控制的抽搐、头痛、神经控制失常等症状。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与Krev-1/rapla结合蛋白KRIT1的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87。

由于如上所述Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——Krev-1/rapla结合蛋白KRIT134.87的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。