[发明专利]一种新的多肽——人磷脂酶49.06和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人磷脂酶49.06，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

脂胆固醇脂酰转移酶(Lecithin cholesterol acyltransferase，LCAT)在胞质胆固醇的脂化作用和高密度脂蛋白上的反转胆固醇转移(reverse cholesteroltransport)中起关键作用。此酶在肝脏中合成，并且与高密度脂蛋白结合成复合物加入血液循环。从外围细胞中来源的胆固醇转移到高密度脂蛋白颗粒上，被LCAT作用于高密度脂蛋白而脂化，之后被整合到脂蛋白中。胆固醇脂被运输到肝脏中。LCAT除去周边组织产生的多余的到达肝脏的胆固醇。

缺乏LCAT的活性活导致组织中的游离的胆固醇聚集。LCAT基因C到T的转换会导致LCAT活性缺失。【.Acta Med.Scand.214：173-176，1983】而G到A的转换导致的LCAT活性缺失会导致角膜不透明和正常红血球场色性贫血(normocytic normochromic anemia)。【Biochem.Biophys.Res.Commun.178：460-466，1991】在鱼眼症(fish-eye disease)中，LCAT不能将高密度脂蛋白中的胆固醇脂化。【Proc.Nat.Acad.Sci.88：4855-4859，1991】在诺朗氏症(Norum disease)中也存在这种LCAT脂化活性的缺乏。

在人中发现了另一种与LCAT类似的基因。与LCAT只在肝脏中表达所不同的是，该新基因在肾脏，胎盘，脾脏，睾丸，胰腺，心脏和骨骼肌中都有表达。该基因所编码的蛋白存在于人胞质中，并且与高密度脂蛋白相关。【Biochem BiophysRes Commun 1999 Apr 2；257(1)：50-6】这种新发现的酶被称为LCAT类似溶血磷脂酶。(LCAT-like lysophospholipase，LLPL)

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人LCAT类似溶血磷脂酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人磷脂酶49.06。

由于如上所述人磷脂酶49.06蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人磷脂酶49.06蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人磷脂酶49.06蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人磷脂酶49.06以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人磷脂酶49.06的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人磷脂酶49.06的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人磷脂酶49.06的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人磷脂酶49.06的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人磷脂酶49.06的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人磷脂酶49.06异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。