[发明专利]一种新的多肽——人基因多效调节物1(PLRG1)蛋白9.9和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人基因多效调节物1(PLRG1)蛋白9.9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

刺激应答的协同信号途径在人体的生长控制中起着重要作用。人的基因多效调节物1(PLRG1)编码一种核WD-蛋白，它作为葡糖以及激素应答的基因多效调节物起作用，其中的WD重复域介导RACK1受体与被激活的蛋白激酶C(PKC)的同工酶作用，PLRG1与PKC-gamma紧密结合，亦与PKC-betaII通过betaII的羧基端结合，PLRG1在人体细胞中的核定位以及氨基端与PKC-betaII羧基端的反应说明羧基端与人体内PKC-betaII的核输入有关。已知的葡糖抑制所需的调节功能发生于控制胰腺beta细胞产生胰岛素的过程中。除不同的己糖转运蛋白的重要功能外，己糖激酶(以葡糖激酶存在于胰腺中)对于监控己糖磷酸化率从而为葡糖抑制产生信号也是至关重要的。WD-40重复在结构上由约40个氨基酸残基的几个串连重复序列构成，每一个含有一个色氨酸-天冬氨酸特征序列模板。WD蛋白由高度保守的重复单元构成，这些重复单元通常以色氨酸-天冬氨酸(WD)结束。它们调控细胞功能例如细胞分裂，细胞命运决定，基因转录，跨膜信号，mRNA修饰以及泡融合(Neer EJ，Schmidt CJ，Nature 1994；371：297-300)。人体中含有这类重复片段的蛋白包括：人体蛋白12.3.，功能为信号转导；人LIS1蛋白，一种涉及I型无脑回的神经蛋白；外被体beta亚基(beta’-COP)，一种与高尔基体膜形成囊泡以介导蛋白转运生物合成而可逆相关的胞质蛋白复合物的组分等。在这些蛋白中，重复的数目在5￣8之间不等。(Ron，D.，C.-H.Chen，J.Caldwell，L.Jamieson，E.Orr，and D.Mochly-Rosen.1994.，Proc.Natl.Acad.Sci.91：839-843)。

基因多效调节物1(PLRG1)作为负调节子反作用于介导葡糖抑制的因子的活性，倘若PLRG1发生突变则会增强对葡糖的敏感，它在葡糖信号方面的突变会基因多效性地影响细胞形态以及延伸的调节。PLRG1编码的蛋白具有七个WD-40重复，与三聚体GTP结合蛋白以及在真核生物中行使不同调节功能的许多其他WD蛋白同源。PLRG1的WD-40重复以及末端延伸与已发现的WD-蛋白不同，因而PLRG1代表了一种新型的调节因子。PLRG1蛋白是一种碱性离子蛋白，被输入核中，也存在于由核膜以及内质网构成的膜部分。PLRG1与参与胰岛素信号的核蛋白激酶C-betaII同工酶选择性作用，可用于治疗与参与胰岛素信号以及与葡糖和激素应答有关的疾病(Nemeth，K.，Salchert，K.，Putnoky，P.，Bhalerao，R.，Koncz-Kalman，Z.，Genes Dev.12(19)，3059-3073(1998))。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人基因多效调节物1(PLRG1)蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人基因多效调节物1(PLRG1)蛋白9.9。

由于如上所述人基因多效调节物1(PLRG1)蛋白9.9蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人基因多效调节物1(PLRG1)蛋白9.9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人基因多效调节物1(PLRG1)蛋白9.9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人基因多效调节物1(PLRG1)蛋白9.9以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人基因多效调节物1(PLRG1)蛋白9.9的多核苷酸的重组载体。