[发明专利]一种新的多肽——人抑癌基因98和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人抑癌基因98，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

通过差异显示mRNA，我们注意到在来源于经致癌物质转化的MSU-11细胞株的同基因的纤维肉瘤细胞株6A/SBl中，其ST7基因的表达较之MSU-1呈6倍低下。

ST7是在一些恶性变细胞中下调表达的基因。ST7表达的改变在翻译和翻译后阶段都有发生。(Oncogene 1999 Jan 14；18(2)：335-42)

ST7基因位于人第八条染色体短臂22.2-23.1位点上，该位点与急性脊髓性白血病位点相同，在肿瘤活检中呈高度多样性。

ST7基因编码一种由859个氨基酸组成的跨膜蛋白，N端492个氨基酸包含一个由40个氨基酸组成的富含半胱氨酸的重复5次的序列，其与已知的低密度脂蛋白受体的配体结合序列相似。由24个氨基酸组成的疏水氨基酸带横跨质膜，C端结构区由343个氨基酸组成。

ST7基因广泛表达于人类正常组织，在心脏和骨骼肌中尤为丰富。Northernanalysis显示，在15个来源于病人的肿瘤细胞株和16个来源于经癌变的MSU-1.1细胞致癌的无胸腺鼠体内的肿瘤细胞株中，16/31的细胞株呈低度或不可检测到的mRNA。Western blotting analysis运用特异性抗多肽抗体显示，ST7在正常纤维原细胞和12个纤维肉瘤细胞株中分别呈高度和低度表达。相应的cDNA序列提示，ST7与fibulin-1D基因相同，fibylin-1D是一种富含cys，钙结合的胞外基质血浆蛋白，有A，B，C，D四种同工型，由选择性剪接产生。用fibulin-1D cDNA表达产物感染6A/SB1细胞和人纤维肉瘤细胞株，结果显示fibulin-1D的表达明显延缓肿瘤在无胸腺鼠体内的形成，表明fibulin-1D的低度表达在肿瘤形成和浸润过程中起了很大作用。(Oncogene 1997 Oct；15(18)：2159-68)

fibulin-1是基膜和结缔组织弹性纤维胞外基质成分和一种血浆蛋白。其pre-RNA的选择性剪切产生其C端的多样性。在人体组织和培养细胞中主要有2.4kb和2.7kb两种fibulin-1mRNA，2.7kb mRNA翻译产生fibulin-1D，与fibulin-1A-C相比，其C端有一独特的1894个氨基酸的C端片断。Fibulin-1D和fibulin-1C在人胎盘中协同表达。

Fibulin-1是聚集蛋白多糖(软骨)和多能聚糖C型凝集素功能区的配体，在血管，皮肤，心脏发育，骨和软骨的发育中都有广泛表达。(J Biol Chem 1999Jul 16；274(29)：20444-9)

本发明的多肽在蛋白水平上与ST7有100％的同源性，是一种新的ST7蛋白，具有类似的生物学功能，命名为人抑癌基因98

由于如上所述人抑癌基因98蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人抑癌基因98蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人抑癌基因98蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人抑癌基因98以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人抑癌基因98的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人抑癌基因98的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人抑癌基因98的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人抑癌基因98的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人抑癌基因98的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人抑癌基因98异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：