[发明专利]一种新的多肽——雌激素受体相关蛋白8.91和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——雌激素受体相关蛋白8.91，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

于一些特定细胞的核上，它能够特异性结合雌激素，从而使细胞作出应激性反应。在一些人的乳腺癌细胞中，存在一种反常的雌激素受体(estrogenreceptor，ER)，其反常现象表现为带电荷配体不能够正常地结合到细胞核中或者受体蛋白在配体缺失的情况下与细胞核发生相互作用(Raam S，Robert N，PappasCA，Tamura H，1998)。对人ER的A/B区域进行定点突变试验，发现已经发生突变的ER最后也能存在于正常的子宫组织中，与其说它是肿瘤特异性突变，却更表现为基因多态现象(Garcia T，Lehrer S，Bloomer WD，Schachter B，1988；Garcia T，Sanchez M et al.，1989)。因此，这种反常的雌激素受体称为雌激素受体相关蛋白。

在正常的子宫组织中，也能找到一些突变的ER mRNA(Fuqua SAW，Allred DCet al.，1991)。已经从人的T-47D_co乳腺癌细胞系中已经分离到能够抵抗抗雌激素的cDNA克隆，这些突变的ER cDNA链中含有移码突变，由其编码产生的雌激素受体相关蛋白在第二个锌指蛋白结构的后面被截断，或者在接近第五个外显子末端处被截断，这种现象与核定位信号的框内删除相似(Grahame ML，Krett NLet al.，1990)。

发生突变的ER cDNA克隆的5’末端核苷酸序列与正常的人ER mRNA相同，但是其3’末端的核苷酸序列却存在很大的分歧。雌激素受体相关蛋白缺少一些重要的结构功能性区域，其中包括正常ER蛋白所拥有的荷尔蒙结合区域(Kumar V，Green S et al.，1987)。然而，往往在外显子和内含子相交结的区段上，雌激素受体相关蛋白与正常雌激素受体蛋白在序列上的分歧相对低于其它的一些区域(Ponglikitmongkol M，Green S，Chambon P，1988)。

雌激素受体突变导致受体对雌激素的低水平结合，含有杂合的B变种ERA基因的妇女往往比那些含有正常两条ER链的妇女更易产生自发性流产现象(FuquaSAW，Fitzgerald SD et al.，1991)。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与雌激素受体相关蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为雌激素受体相关蛋白8.91。

由于如上所述雌激素受体相关蛋白8.91蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的雌激素受体相关蛋白8.91蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新雌激素受体相关蛋白8.91蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——雌激素受体相关蛋白8.91以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码雌激素受体相关蛋白8.91的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码雌激素受体相关蛋白8.91的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产雌激素受体相关蛋白8.91的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——雌激素受体相关蛋白8.91的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——雌激素受体相关蛋白8.91的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与雌激素受体相关蛋白8.91异常相关的疾病的方法。