[发明专利]一种新的多肽——RNA聚合酶II相关蛋白9.57和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——RNA聚合酶II相关蛋白9.57，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

的蛋白因子统称为“转录因子”。这些反式作用的蛋白因子有两大类，一类是结合于启动子核心序列如TATA框及其附近的因子，称为转录因子或普遍性转录因子，如TFIIA、TFIIB、TFIID、TFIIE等，另一类为转录调控因子。

RNA聚合酶的亚基是转录某个阶段或整个过程都需要的，但它们往往不是对个别的启动子特异性的。

转录因子IIF(TFIIF)是在转录周期中起始与延伸阶段RNA聚合酶II的别构剂，在起始阶段转录因子IIF围绕着RNA聚合酶II诱导DNA启动子在复合体上卷曲为几乎一个反转，这一复合体包含普遍性的转录因子TATA结合蛋白、TFIIB和TFIIE。研究显示，在延伸阶段，转录因子IIF也支持RNA聚合酶II更加活跃的构象。

转录因子IIF的RNA聚合酶II相关蛋白74亚基上的一个特定区域，对于前起始复合物异构化作用是必需的，对于延伸的继续也是必需的。这一区域的氨基酸置换显示，它具有转录起始与延伸相似的作用。氨基酸突变显示这一区域上的L155，W164，N172，I176，and M177氨基酸残基对于转录是非常重要的。转录因子IIF也显示了对于快速延伸的RNA聚合酶II比之于停滞的RNA聚合酶II有更高的高亲和性。RNA聚合酶II相关蛋白74功能区域上I176位氨基酸残基的置换会降低RNA聚合酶II相关蛋白74对于转录因子IIF的亲和性。(Mol Cell Biol1999 Dec；19(12)：8372-82)

研究发现，转录因子IIF的RNA聚合酶II相关蛋白74的磷酸化作用与病毒HIV-I长末端的重复序列的Tat活性转录是密切相关的。(Virology 2000 Mar15；268(2)：452-60)

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv 304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与RNA聚合酶II相关蛋白74的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为RNA聚合酶II相关蛋白9.57。

由于如上所述RNA聚合酶II相关蛋白9.57蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的RNA聚合酶II相关蛋白9.57蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新RNA聚合酶II相关蛋白9.57蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——RNA聚合酶II相关蛋白9.57以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码RNA聚合酶II相关蛋白9.57的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码RNA聚合酶II相关蛋白9.57的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产RNA聚合酶II相关蛋白9.57的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——RNA聚合酶II相关蛋白9.57的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——RNA聚合酶II相关蛋白9.57的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与RNA聚合酶II相关蛋白9.57异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。