[发明专利]一种新的多肽——人核苷酸切除修复蛋白13.31和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人核苷酸切除修复蛋白13.31，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

和延续来说，DNA分子要求保持高度的精确性和完整性。生物体内外许多因素都能造成DNA分子结构的损伤，如电离辐射，紫外线，烷化剂，氧化剂等。一种因素可能造成许多类型的损伤，一种类型的损伤也可能来自不同因素的作用。细胞中不但有能精密复制DNA分子的机制，还有能够修复发生错误的DNA的系统。这些DNA修复系统保护细胞不受突变，复制出错，基因组不稳定和细胞死亡等。这些系统的失常会引发癌症和衰老。

一种最重要的DNA修复通路是核苷酸切除修复(nucleotide excisionrepair，NER)。这种修复机制修复大段的DNA损伤。这些损伤包括紫外线、电离辐射形成的大段损伤等。切除修复包括五个步骤：识别，切割，降解聚合以及最后的连接。识别步骤需要ERCC(切除修复交叉补足基因excision-repaircross-complementing)，XPA和XPF等基因产物与TFIIH转录因子相互作用。双切割步骤也需要ERCC和XPG等基因产物的参与。

ERCC基因包括几种，ERCC1、ERCC2、ERCC3、ERCC4、ERCC5和ERCC6等。ERCC3与着色性干皮病(xeroderma pigmentosum，XP)互补基团B相同。着色性干皮病互补基团B的病人同时具有着色性干皮病和Cockayne综合症(Cockaynesyndrome)的临床表现。【Mutat.Res.106：347-356，1982】ERCC3缺乏的啮齿类动物表现出人类的着色性干皮病的表型。【.Cell 62：777-791，1990】有可能同时发生的着色性干皮病/Cockayne综合症症状与同时发生的转录/修复缺陷相关。.【J.Biol.Chem.271：15898-15904，1996.】试验表明，ERCC4可以有效地修复啮齿类中的NER突变，并且在这些突变中，ERCC4的蛋白水平降低了。在XP-F患者的细胞中，ERCC4的蛋白水平下降到小于5％。ERCC4与MEI-9的相似性(40％)提示了ERCC4与细胞的减数分裂有关。【Mol Cell Biol 1996Nov；16(11)：6553-62】

核苷酸切除修复通路的缺陷除了与着色性干皮病和Cockayne综合症有关以外，还与trichothiodystrophy(TTD)相关。【.Am.J.Hum.Genet.60：320-329，1997】

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人ERCC4蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人核苷酸切除修复蛋白13.31。

由于如上所述人核苷酸切除修复蛋白13.31蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人核苷酸切除修复蛋白13.31蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人核苷酸切除修复蛋白13.31蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人核苷酸切除修复蛋白13.31以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人核苷酸切除修复蛋白13.31的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人核苷酸切除修复蛋白13.31的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人核苷酸切除修复蛋白13.31的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人核苷酸切除修复蛋白13.31的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人核苷酸切除修复蛋白13.31的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人核苷酸切除修复蛋白13.31异常相关的疾病的方法。