[发明专利]一种新的多肽——人类固醇还原酶11.66和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人类固醇还原酶11.66，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

固醇5α还原酶催化由睾丸激素转变到更有效的雄激素二氢睾酮的还原反应。此酶是厌水性的蛋白质，由259个氨基酸构成，分子量约为29kD。其基因位于5号染色体5pl5位置。

在男性中，此类固醇作用于许多能够对雄激素作出响应的靶组织，调节广泛的内分泌过程，包括胎儿时期男性性分化，前列腺生长等。【Proc Natl Acad SciUSA1990 May；87(10)：3640-4】

现在已经发现了两种类固醇5α还原酶缺乏症。一种是由于结构的改变，导致其Km值异常，活性降低，另一种是在机体中检测不到类固醇5α还原酶的活性。【Clin.Res.26：47A only，1978】缺乏类固醇5α还原酶会导致男性的假两性畸形(MALE PSEUDOHERMAPHRODITISM)同时，类固醇5α还原酶缺乏的患者除了外生殖器发育不全之外，他们的前列腺和精子囊的分泌功能也发育不全。结果受累的患者精液黏性极高，射精时精液体积很少，虽然其中的精子数目可能是正常的。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人类固醇5α还原酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人类固醇还原酶11.66。

由于如上所述人类固醇还原酶11.66蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人类固醇还原酶11.66蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人类固醇还原酶11.66蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人类固醇还原酶11.66以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人类固醇还原酶11.66的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人类固醇还原酶11.66的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人类固醇还原酶11.66的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人类固醇还原酶11.66的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人类固醇还原酶11.66的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人类固醇还原酶11.66异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID N0：1中190-510位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1508位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人类固醇还原酶11.66蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。