[发明专利]一种新的多肽——人剪切因子17.05和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人剪切因子17.05，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

体mRNA产物一般缺乏生物活性，需要经过剪切加工之后才成为有活性的RNA。绝大多数真核基因的结构基因均含有插入序列，所谓基因不连续性，因此转录产物需要经过剪切等过程出去内含子序列。

剪切过程是将内含子从前体mRNA中去除的过程。这一过程是通过两步磷酰基转移反应完成的。在第一步中，5’外显子从被切开，形成一个套索状的中间体。在第二步中，3’剪切位点被切开，外显子连接在一起，内含子被释放。这一过程是由一类称为剪切子的多组分酶所催化的。

在高等真核生物中，有些基因的mRNA存在不止一种的剪切方式，这称为旁路剪切途径。旁路剪切途径在基因表达调控中起重要作用。这种转录后调控机制的一个明显的优势在于对旁路剪切位点的调控使得机体能够对基因的表达进行定性的或定量的调控。【Proc.Natl.Acad.Sci，(89)2511-2515】在分化和胚胎发育中，mRNA的旁路剪切都发挥着重要的作用。例如，在肌形成和性别决定中旁路剪切至关重要。

现在已经鉴定了在早期剪切选择中相关的一些剪切因子，例如PR264/SC35。这是一种磷蛋白，分子量大约33-35kD，对剪切子前体复合物A的组装以及剪切的第一步是必须的。研究表明，PR264/SC35是ET序列互补的反义转录本。而ET序列可以反式剪切成胸腺c-myb mRNA。在鸡和人的胸腺中，c-myb RNA由位于不同染色体上的编码序列(ET序列)反式剪切而来。而ET序列是可以进行双向转录的，其反义转录mRNA可以编码一种非常保守的蛋白，这就是PR264。【ProcNatl Acad Sci USA 1992 Apr 1；89(7)：2511-5】

研究表明，PR264/SC35直接或间接的参与了ET序列和c-myb RNA的反式剪切。ET序列的反式剪切调节着c-myb的活性，而ET的反式剪切又是由PR264/SC35调节的。在造血细胞中，PR264/SC35蛋白的量又由c-myb产物所调节。因此，ET-c-myb-PR264/SC35构成了一个相互牵制的反馈剪切系统。

c-myb是一种原癌基因，一般在未成熟的造血细胞中表达，通过调控与发育相关的重要基因的表达调节着细胞的增殖和分化。因此，上述的ET-c-myb-PR264/SC35系统的稳定对c-myb的正常功能是非常重要的。其中任何一环出现突变，都会直接影响c-myb的功能，导致各种疾病。【Proc Natl Acad Sci USA1992 Dec 15；89(24)：11683-7】

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人PR264/SC35蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人剪切因子17.05。

由于如上所述人剪切因子17.05蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人剪切因子17.05蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人剪切因子17.05蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人剪切因子17.05以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人剪切因子17.05的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人剪切因子17.05的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人剪切因子17.05的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人剪切因子17.05的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人剪切因子17.05的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。