[发明专利]一种新的多肽——人含四多肽重复序列的蛋白15和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人含四多肽重复序列的蛋白15，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人发现在高等真核生物的多种蛋白中广泛地存在着一种重复序列片段---四多肽重复序列片段。该重复序列片段由34个氨基酸残基组成，在真菌中有五种蛋白含有这一重复序列片段，这些蛋白均在细胞分化调控过程中起重要地调节作用[Sikorski RS，Boguski MS et al.，1990，Cell，60：307-317]。

含有该重复序列片段的蛋白构成了一独立的蛋白家族，即含四多肽重复序列蛋白家族。该蛋白家族成员的分布非常广泛，且在生物体内参与调控多种重要的生理过程，包括应激反应、干扰素反应、线粒体及过氧化物酶体的蛋白运输、tRNA合成、神经系统发育及非活性胆固醇及其受体的组成等。这些蛋白参与多种重要的细胞途径，可能在蛋白与蛋白、蛋白与膜的相互作用过程中起重要的调节作用[Anita E.Murthy，Andre Bernards et al.，1996，DNA and Cellbiology，15：727-735]。

1996年，Anita等人从人中克隆得到了两个新的含四多肽重复序列片段的蛋白---tpr1及tpr2。编码这两个蛋白的基因分别定位于人染色体的第5和第17条染色体上，编码5和7个四多肽重复序列。该两个蛋白在生物体内与NF1蛋白GAP相似的结构域相作用，以调节相应的生理过程的进行。其中，tpr2蛋白与P28蛋白非常相似，是一种PKR激酶抑制物，调控着PKR激酶在体内的作用活性。众所周知，PKR蛋白激酶在生物体内调控多种重要的生物学反应的进行，其作用异常将引发多种相关组织发育及代谢类疾病。tpr2蛋白作为PKR激酶作用活性的调控物，其突变或表达异常将直接影响体内PKR激酶的作用活性。该蛋白在体内通常与多种胚胎发育紊乱性疾病、神经系统疾病及免疫系统疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人含四多肽重复序列的蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人含四多肽重复序列的蛋白15。

由于如上所述人含四多肽重复序列的蛋白15蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人含四多肽重复序列的蛋白15蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人含四多肽重复序列的蛋白15蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人含四多肽重复序列的蛋白15以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人含四多肽重复序列的蛋白15的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人含四多肽重复序列的蛋白15的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人含四多肽重复序列的蛋白15的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人含四多肽重复序列的蛋白15的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人含四多肽重复序列的蛋白15的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人含四多肽重复序列的蛋白15异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；