[发明专利]一种新的多肽——蝶呤钼氧化还原酶9和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——蝶呤钼氧化还原酶9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

钼酶在原始细菌到高等植物和动物，包括人类中都有重要作用。

钼酶中的钼原子通过一个小分子与酶蛋白结合，这个小分子可以是一个铁-钼协同因子(iron-molybdenum cofactor)或蝶呤-钼协同因子(pterin-molybdenumcofactor)。除了一种把氮原子转变成氨的固氮酶(nitrogenase)结合铁-钼协同因子外，其余的钼酶都有蝶呤-钼协同因子，这些钼酶由于结构、生物学功能和酶特性上的相似，可以归成一类，即蝶呤钼氧化还原酶。

钼酶催化氮、硫循环中的一些步骤，而遗传上的钼酶缺乏会导致严重的临床异常。在动物体内，一种蝶呤钼氧化还原酶，肺亚硫酸盐氧化酶催化含硫化合物代谢的最后一步，即硫酸盐的形成；而另一种黄嘌呤氧化酶则被怀疑与心脏病如心肌梗塞有关。

蝶呤钼氧化还原酶大小从715个到1246个氨基酸残基不等，有三个特征序列，第一个位于N-端的一个保守部位，包含两个Cys残基，其序列为：(STAN)-X-(CH)-X(2，3)-C-(STAG)-(GSTVMF)-X-C-X-(LIVMFYW)-X-(LIVMA)-X(3，4)-(DENQKHT)(X为任意氨基酸残基)，两个Cys残基与结合蝶呤-钼协同因子有关，而bisC、bisZ和torA无此序列。

第二个位于酶的中央部位，其序列为：(STA)-X-(STAC)(2)-X(2)-(STA)-D-(LIVMF)(2)-L-P-X-(STAC)(2)-X(2)-E，fdnG、fdoG、nasA、napA和narB无此序列。第三个序列为：A-X(3)-(GDT)-I-X-(DNQTK)-X-(DEA)-X-(LIVM)-X-(LIVMC)-X-(NS)-X(2)-(GS)-X(5)-A-X-(LIVM)-(ST)，na sA、napA和narB无此序列。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与蝶呤钼氧化还原酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为蝶呤钼氧化还原酶9。

由于如上所述蝶呤钼氧化还原酶9蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的蝶呤钼氧化还原酶9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新蝶呤钼氧化还原酶9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——蝶呤钼氧化还原酶9以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码蝶呤钼氧化还原酶9的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码蝶呤钼氧化还原酶9的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产蝶呤钼氧化还原酶9的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——蝶呤钼氧化还原酶9的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——蝶呤钼氧化还原酶9的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与蝶呤钼氧化还原酶9异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。