[发明专利]一种新的多肽——人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

C5A3)属于Na⁺转运蛋白家族。该基因与其家族中的其它基因一样，依赖Na提供的电化学梯度来推动肌醇的运输，在哺乳动物中它对于透调节起重要作用，从而维持细胞形态。它主要分布在人类脑、肾、胎盘等组织细胞中，而在血浆和间质中较少。

1997年John J.Mallee等人克隆出的SLC5A3基因，其表达产物的功能是调节细胞透压，维持细胞中磷酸肌醇信号转导产物的前体物质——肌醇的浓度梯度。SLC5A3基因位于人21号染色体长臂的22.1区域，它包含一个启动子和两个外显子，长度约为26kb。外显子1在5′端非编码区含有175bp的序列，它位于外显子2上游15bp处。外显子2长为9.5kb，含有5′端一短的非编码区、全部完整的2157bp的开放阅读框及含推测为7个的多腺苷酸化信号的长约7kb的3′端非编码序列。外显子1紧邻于第二个NotI切点下游，而外显子2位于最后一个EcoRI切点上游。该基因仅有一个内含子，长约15kb，且含有184个bp的腺苷酸的重复序列及30个bp的TG二核苷酸的重复序列。SCL5A3基因的启动子位于-128/+134区域，该启动子的活力比BGTl启动子强10倍以上，而在-128/-44区域的富含GC的序列是使该启动子具强启动活力的原因。该基因的-2444/-129处还有一涨度调节序列。SCL5A3基因在哺乳动物中高度保守。[JohnJ.Mallee，Genomics，1997，46：459-465]

SCL5A3基因对于细胞调节(包括膜结构、信号转导、透调节等)有重要作用。在生物体内，若过度表达则与引起唐氏先天愚症有关，该病患者大脑中肌醇含量增加。大多数第21条染色体呈三倍体者无法阻SCL5A3基因的表达，从而使耗能主动运输和肌醇的易化扩散在表达SCL5A3基因的部分或全部细胞中增加。SCL5A3变异的纯合体会由于细胞在高下不能降低胞内的钾浓度而引起肾脏细胞的死亡。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91。

由于如上所述人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人依赖于Na+的肌醇协同转运蛋白8.91异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。