[发明专利]一种人线粒体溶质载体蛋白异构体及其编码序列

说明书

本发明涉及分子生物学、酶学、生理学以及基因工程等领域。具体地，本发明涉及一种在人类垂体中表达的hMSC-homolog蛋白及其核酸序列。本发明还涉及该蛋白和核酸序列的制备方法和用途。

线粒体是真核生物体内提供能量的场所。通过复杂的生物化学作用，能量主要以ADP／ATP的形式临时储存下来，再通过一些载体将ADP／ATP转运到需要能量的地方去。这些载体被称做腺嘌呤核苷酸转移酶(adenine nucleotide translocase)或者ADP／ATP转运子(ADP／ATP translocator)或者线粒体溶质载体(mitochondrialsolute carriers，MSC)。(Mol Endocrinol 1989 Sep；3(9)：1498-505)。这样的背景下，这些载体蛋白的重要性不言而喻。

本发明中，我们在人类垂体中克隆到人hMSC基因(Genbank AccessionNo．AF155660)的同源基因hMSC-homolog。

在本发明被公布之前，尚未有任何公开或报道过本专利申请中提及的人类hMSC-homolog蛋白序列及其核酸序列。

本发明的第一目的就是提供一种新的人基因hMSC-homolog(Genbank AccessionNo．AF267854)，该基因是一个人hMSC-homolog蛋白基因。

本发明的第二目的是提供一种新的人蛋白hMSC-homolog。

本发明的第三目的是提供一种利用重组技术生产上述的新的人hMSC-homolog蛋白和核酸序列的方法。

本发明还提供了这种人hMSC-homolog蛋白多肽和编码序列的应用。

在本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，该分子包括：编码具有人hMSC-homolog蛋白质活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO．6中从核苷酸第379-909位DNA分子的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO．6中从核苷酸第379-909位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码具有SEQ ID NO．7所示的氨基酸序列的多肽。更佳地，所述的序列具有SEQ ID NO．6中从核苷酸第379-909位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离出的人hMSC-homolog蛋白质多肽，它包括：具有SEQ ID NO．7氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO．7序列的多肽。

在本发明的另一方面，还提供了一种载体，它包含上述的DNA分子。

在本发明的另一方面，还提供了一种用上述载体转化的宿主细胞。在一个实例中该宿主细胞是大肠杆菌；在另一实例中，该宿主细胞是真核细胞。

在本发明的另一方面，还提供了一种产生具有人hMSC-homolog蛋白质活性的多肽的方法，其步骤如下：

(1)将编码具有人hMSC-homolog蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成人hMSC-homolog蛋白表达载体，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO．6中从核苷酸第379-909位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(2)将步骤(1)中的表达载体转入宿主细胞，形成人hMSC-homolog蛋白的重组细胞；

(3)在适合表达人hMSC-homolog蛋白多肽的条件下，培养步骤(2)中的重组细胞；

(4)分离出具有人hMSC-homolog蛋白活性的多肽。

较佳地，在该方法中使用的核酸序列具有SEQ ID NO．6中第379-909位的序列。

本发明还提供了与hMSC-homolog蛋白多肽特异性结合的抗体。

在本发明中，“分离的”、“纯化的”或“基本纯的”DNA是指，该DNA或片段已从天然状态下位于其两侧的序列中分离出来，还指该DNA或片段已经与天然状态下伴随核酸的组份分开，而且已经与在细胞中伴随其的蛋白质分开。