[发明专利]一种人核受体结合因子蛋白及其编码序列

说明书

本发明涉及分子生物学、酶学、生理学以及基因工程等领域。具体地，本发明涉及一种在人类树突状细胞中表达的hNRBF2蛋白及其核酸序列。本发明还涉及该蛋白和核酸序列的制备方法和用途。

核受体是在核内的一些受体，通过与特定的激动剂(配体)结合后触发某些调控元件，调节下游基因转录过程。在核受体与配体结合时，有可能需要一些特殊蛋白的参与，即核受体结合因子蛋白(nuclear receptor binding factor，NRBF)。目前人们已经找到了两个核受体结合因子蛋白，分别为NRBF1和NRBF2。(Gene 1998Oct 23；221(2)：225-33)，(Biochim Biophys Acta 2000 Jan 31；1490(1-2)：189-97)。

本发明中，我们在人类树突状细胞中克隆到挪威鼠NRBF2基因的同源基因hNRBF2。

在本发明被公布之前，尚未有任何公开或报道过本专利申请中提及的人类hNRBF2蛋白序列及其核酸序列。

本发明的第一目的就是提供一种新的人基因hNRBF2(Genbank AccessionNo．AF267866)，该基因是一个人hNRBF2蛋白基因。

本发明的第二目的是提供一种新的人蛋白hNRBF2。

本发明的第三目的是提供一种利用重组技术生产上述的新的人hNRBF2蛋白和核酸序列的方法。

本发明还提供了这种人hNRBF2蛋白多肽和编码序列的应用。

在本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，该分子包括：编码具有人hNRBF2蛋白质活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO．6中从核苷酸第153-986位DNA分子的核苷酸序列有至少70％的同源性：或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO．6中从核苷酸第153-986位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码具有SEQ ID NO．7所示的氨基酸序列的多肽。更佳地，所述的序列具有SEQ ID NO．6中从核苷酸第153-986位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离出的人hNRBF2蛋白质多肽，它包括：具有SEQ ID NO．7氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO．7序列的多肽。

在本发明的另一方面，还提供了一种载体，它包含上述的DNA分子。

在本发明的另一方面，还提供了一种用上述载体转化的宿主细胞。在一个实例中该宿主细胞是大肠杆菌；在另一实例中，该宿主细胞是真核细胞。

在本发明的另一方面，还提供了一种产生具有人hNRBF2蛋白质活性的多肽的方法，其步骤如下：

(1)将编码具有人hNRBF2蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成人hNRBF2蛋白表达载体，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO．6中从核苷酸第153-986位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(2)将步骤(1)中的表达载体转入宿主细胞，形成人hNRBF2蛋白的重组细胞；

(3)在适合表达人hNRBF2蛋白多肽的条件下，培养步骤(2)中的重组细胞；

(4)分离出具有人hNRBF2蛋白活性的多肽。

较佳地，在该方法中使用的核酸序列具有SEQ ID NO．6中第153-986位的序列。

本发明还提供了与hNRBF2蛋白多肽特异性结合的抗体。

在本发明中，“分离的”、“纯化的”或“基本纯的”DNA是指，该DNA或片段己从天然状态下位于其两侧的序列中分离出来，还指该DNA或片段已经与天然状态下伴随核酸的组份分开，而且已经与在细胞中伴随其的蛋白质分开。