[发明专利]一种人锌指蛋白异构体及其编码序列

说明书

本发明涉及分子生物学、酶学、生理学以及基因工程等领域。具体地，本发明涉及一种在人类下丘脑中表达的hZNF216-iso蛋白及其核酸序列。本发明还涉及该蛋白和核酸序列的制备方法和用途。

锌指结构是指蛋白质肽链上结合DNA的特定短序列，通过结合DNA来调控基因的转录与表达，因而包含有锌指结构的蛋白广泛参与了转录调控的生理过程。(JMolBiol 1999 Oct 22；293(2)：215-8)。

锌指蛋白ZNF216在人和鼠中高度保守，最初的发现者根据若干实验数据分析其可能与耳聋相关。不过已经有报道称，先前科学家们提出其可能与耳聋有关的猜想被实验所否决。(Gene 1998 Jul 30；215(2)：461-9)。然而由于在进化中的保守性，人们仍有理由相信ZNF216有其独特的生理作用。

本发明中，hZNF216-iso是一个新的锌指蛋白，它与ZNF216同源。蛋白结构决定了它的生理功能，可以说明本发明中的hZNF216-iso有与ZNF216相似或者相同的功能。

本发明中，我们在人类下丘脑中克隆到人hZNF216基因的同源基因hZNF216-iso。

在本发明被公布之前，尚未有任何公开或报道过本专利申请中提及的人类hZNF216-iso蛋白序列及其核酸序列。

本发明的第一目的就是提供一种新的人基因hZNF216-iso(Genbank AccessionNo．AF261138)，该基因是一个人hZNF216-iso蛋白基因。

本发明的第二目的是提供一种新的人蛋白hZNF216-iso。

本发明的第三目的是提供一种利用重组技术生产上述的新的人hZNF216-iso蛋白和核酸序列的方法。

本发明还提供了这种人hZNF216-iso蛋白多肽和编码序列的应用。

存本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，该分子包括：编码具有人hZNF216-iso蛋白质活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO．6中从核苷酸第21-647位DNA分子的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO．6中从核苷酸第21-647位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码具有SEQ ID NO．7所示的氨基酸序列的多肽。更佳地，所述的序列具有SEQ ID NO．6中从核苷酸第21-647位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离出的人hZNF216-iso蛋白质多肽，它包括：具有SEQ ID NO．7氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO．7序列的多肽。

在本发明的另一方面，还提供了一种载体，它包含上述的DNA分子。

在本发明的另一方面，还提供了一种用上述载体转化的宿主细胞。在一个实例中该宿主细胞是大肠杆菌；在另一实例中，该宿主细胞是真核细胞。

在本发明的另一方面，还提供了一种产生具有人hZNF216-iso蛋白质活性的多肽的方法，其步骤如下：

(1)将编码具有人hZNF216-iso蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成人hZNF216-iso蛋白表达载体，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO．6中从核苷酸第21-647位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(2)将步骤(1)中的表达载体转入宿主细胞，形成人hZNF216-iso蛋白的重组细胞；

(3)在适合表达人hZNF216-iso蛋白多肽的条件下，培养步骤(2)中的重组细胞；

(4)分离出具有人hZNF216-iso蛋白活性的多肽。

较佳地，在该方法中使用的核酸序列具有SEQ ID NO．6中第21-647位的序列。

本发明还提供了与hZNF216-iso蛋白多肽特异性结合的抗体。

在本发明中，“分离的”、“纯化的”或“基本纯的”DNA是指，该DNA或片段已从天然状态下位于其两侧的序列中分离出来，还指该DNA或片段已经与天然状态下伴随核酸的组份分开，而且已经与在细胞中伴随其的蛋白质分开。