[发明专利]一种新的多肽——人C2H2型锌指蛋白2510.56和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人C2H2型锌指蛋白2510.56，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

调控对于基因的正常表达及发挥生物学功能是十分重要的，通常由转录调控因子来完成这一过程。转录调控因子在生物体内参与决定基因在何种组织及何种发育阶段开始转录，编码这类蛋白的基因如发生突变，不但该基因自身不能正常表达，而且受其调节的许多基因也不能正常的进行转录与表达。转录因子对基因表达的调控主要通过转录因子与特定的DNA序列结合、转录因子间的相互作用及转录因子与常规转录机构的相互作用在完成。根据结构基序的不同，已知的DNA结合蛋白可主要分为两类：含有螺旋-转角-螺旋基序的蛋白及锌指蛋白[Kamal Chowdhury，Heidi Rohdawohld et al.，Nucleic AcidsResearch，1988，16：9995-10011]。

研究发现，锌指蛋白在不同生物的各种组织中均有表达，这些组织包括造血细胞、脑、神经系统、各种与肿瘤相关的组织和无限增殖细胞系组织等。其在这些组织的基因表达过程中均起着极为重要的作用。

锌指蛋白及其结构域根据其锌原子结合的数目及位置的不同可分为不同的类别。C2H2型锌原子结合结构域最早在蛋白转录因子IIIA中被得到，是真核生物转录因子中分布最广的DNA结合结构域。C2H2型锌指蛋白的蛋白序列中均含有下列保守的序列特征：(Tyr，Phe)-X-Cys-X(2，4)-Cys-X3-Phe-X5-Leu-X2-His-X(3，5)-His(其中X表示任意氨基酸残基；半胱氨酸与组氨酸与锌原子形成配位键，结合锌原子；其它三个保守的氨基酸残基形成疏水性中心区域；其它变化的氨基酸残基负责介导蛋白与其它分子的相互作用)。一个锌指蛋白可能含有一个或多个锌指结构域，这些结构域在生物体内独立完成自己的生理学功能。在很多情况下，含有锌指结构域的蛋白与特殊的双链及单链DNA序列相互作用，起着转录调节因子的作用。现有研究发现，C2H2类型的锌指结构域不仅在一些组织的基因表达过程中起重要的调节作用，其在发育调节过程亦起着非常关键的作用。其表达异常将直接导致生物体内一些相关基因的表达异常，从而引发各种相关的疾病。

1995年，Backer等人又从人中克隆得到了一新的人C2H2型锌指蛋白25，并对该蛋白的结构及功能进行了研究。该蛋白的氨基酸序列中亦含有如上所述的C2H2型锌指蛋白保守的序列片段。该蛋白在生物体的多种组织均有表达，但在脑中高表达。其在生物体内参与调控多种基因的转录与表达，该蛋白的突变或表达异常将直接影响相关基因在体内的表达，进而引发各种相关的发育及代谢紊乱性疾病。该蛋白在生物体内通常与一些胚胎发育紊乱性疾病、神经系统疾病、免疫系统疾病及相关组织的恶性紊乱性疾病，如肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病[Becker K.G.，Nagle J.W.etal.，1995，Hum Mol Genet，4(4)：685-691]。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人C2H2型锌指蛋白25的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人C2H2型锌指蛋白2510.56。

由于如上所述人C2H2型锌指蛋白2510.56蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人C2H2型锌指蛋白2510.56蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人C2H2型锌指蛋白2510.56蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人C2H2型锌指蛋白2510.56以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人C2H2型锌指蛋白2510.56的多核苷酸的重组载体。