[发明专利]一种新的多肽——人DNA修复蛋白10.23和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人DNA修复蛋白10.23，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞都演化出一系列的DNA修复途径以抵御各种类型DNA损伤的有害影响。在真核生物中，紫外线(UV)损伤的核苷酸切除修复(NER)需要许多基因产物，其中rad-18基因产生的rad-18蛋白参与去除UV诱导的DNA损伤以及电离辐射损伤的DNA修复途径，这第二条途径有别于经典的核苷酸切除修复，rhp51基因及rad2基因的产物也参与这第二条修复途径。

Rad-18基因有一些非比寻常的特征：(1)它是DNA修复基因中唯一一个与SMC家族密切相关的DNA修复基因；(2)除去其在DNA损伤中的修复作用，还有其他重要的功能，即参与DNA复制的功能；(3)rad-18突变型对UV及γ辐射均有敏感性。Rad-18蛋白属于SMC家族是因其具有该家族的一切主要特征：氨基酸长度在1100至1500之间，在约40位氨基酸或120位氨基酸位上具有一个Walker型A核苷酸结合位点，具有两个卷曲螺旋域，第一个区域有240至350个氨基酸，第二个区域有280至380个氨基酸，中间由160至210个氨基酸的间隔区分开，还有一个近C端的高度保守区域，是参与结合核苷酸的Walker型B位点。SMC超家族中的其他成员都参与染色体构建，但rad-18蛋白与染色体的浓缩及分离无关。

Rad-18蛋白还有两个核定位信号(NLSs)，位于22至25位氨基酸及41至44位氨基酸。在这两个核定位信号之间有16个氨基酸的间隔，要比通常的二分核定位信号间的10个碱基长。在第一个序列的上游约10个氨基酸处，有一个在NLSs中经常被发现的酪蛋白激酶II位点(SLEE)。上述独特的结构使rad-18蛋白成为一种与重组及复制有关的具有运动功能的动力蛋白。该蛋白保守的头部及尾部是修复分离的双链所必需的，它对DNA损伤的修复与参与DNA形成相协调。

1998年发现的KIAA0594蛋白与上述的RAD18蛋白同源，因此也可能是一种DNA修复蛋白。【DNA Res 5，31-39(1988)】

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与KIAA0594的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人DNA修复蛋白10.23。

由于如上所述人DNA修复蛋白10.23蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人DNA修复蛋白10.23蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人DNA修复蛋白10.23蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人DNA修复蛋白10.23以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DNA修复蛋白10.23的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DNA修复蛋白10.23的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人DNA修复蛋白10.23的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人DNA修复蛋白10.23的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人DNA修复蛋白10.23的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人DNA修复蛋白10.23异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；