[发明专利]一种新的多肽——人突触小泡蛋白11.66和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人突触小泡蛋白11.66，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

神经元之间的功能接触点，其可对信息进行传递核收集，使神经冲动信息作定向传导。按信息传递方式的不同，可将突触分为电突触和化学突触。化学突触包括突触前突起始末、突触间隙和突触后膜三部分。在突触前突起始末阶段，释放递质的神经元轴突末梢形成许多突触小泡。突触小泡内含有神经递质或神经肽，这些递质通过突触间隙形成相应的神经冲动，进而在突触后膜与特异的受体蛋白结合以发挥其生理学活性。由此可知，含有神经递质的突触小泡的形成是神经递质传导及发挥其生物学活性的起始，该步骤的异常将直接影响相关信息在体内的传递，进而影响一系列相关的生物学过程的发生。突触小泡由大量的突触小泡蛋白组成，这些蛋白与多种体内转运蛋白相似，其氨基酸序列中均含有高度保守的12个跨膜结构区域。该结构区域跨膜结构域是神经递质传导的重要通道，其突变或异常将导致神经递质传导异常，进而影响相关生理学反应的发生。

人们已从多种生物体内克隆得到了多种突触小泡蛋白，包括SV2A、SV2B及SV2C。这些蛋白均具有相似的结构特征，它们的蛋白序列中均含有保守的12个跨膜结构区域。这些蛋白有的被糖基化，而有的未被糖基化。它们均在体内构成突触小泡以传递神经递质。1998年，Janz等人又从人中克隆得到了一新的突触小泡蛋白。该蛋白亦是神经突触小泡的重要组成成分，其蛋白序列中亦含有高度保守的12个跨膜结构区域。该蛋白仅在脑及内分泌细胞中表达，其在整个脑区域均有表达，尤其在大脑皮层的锥形神经元中高表达[Janz R.，Hofmann K.etal.，1998，J Neurosci，18(22)：9269-9281]。该突触小泡蛋白主要负责传递神经递质，其突变或表达异常将导致相关神经递质的传递异常，进而影响相关的体内代谢过程的发生。该蛋白在体内通常与发育代谢紊乱性疾病、神经系统疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人突触小泡蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人突触小泡蛋白11.66。

由于如上所述人突触小泡蛋白11.66蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人突触小泡蛋白11.66蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人突触小泡蛋白11.66蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人突触小泡蛋白11.66以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人突触小泡蛋白11.66的多核苷酸的重组载体。    

本发明的另一个目的是提供含有编码人突触小泡蛋白11.66的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人突触小泡蛋白11.66的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人突触小泡蛋白11.66的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人突触小泡蛋白11.66的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人突触小泡蛋白11.66异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。