[发明专利]一种新的多肽——人钠钾泵9.57和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人钠钾泵9.57，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

胞中维持离子浓度的稳定对细胞的动态平衡和功能都是至关重要的。在真核细胞中高浓度的钾离子和低浓度的钠离子浓度差是由钠-钾-ATP酶维持的。钠-钾-ATP酶又称概-钾泵，其作用是在消耗代谢能的情况下逆浓度差将细胞内的钠离子移出膜外，同时把细胞外的钾离子移入膜内，从而保持了膜内高钾膜外高钠的不均衡离子分布。

钠钾泵是镶嵌在膜的脂质双分子层的一种特殊蛋白质，它除了具有对钠离子，钾离子的转运功能外，还具有ATP酶的活性，可以分解ATP使之释放能量，并能利用此能量进行钠离子和钾离子的主动转运。钠钾泵的活性可以被激素，第二信使，蛋白激酶A1和蛋白激酶C所调控。

钠钾泵由两个亚基构成。对于钠离子和钾离子的转运来说，这两个亚基都是不可缺少的。α亚基包含阳离子和ATP结合位点，常被称为催化亚基。β亚基与泵的结构稳定有关。并且影响对钾离子的敏感程度。【J.B.C，Volume 272，Number19，Issue of May 9，1997 12366-12372】

细胞膜上的钠钾泵活动的意义是：1、由钠钾泵活动造成的细胞内高钾离子，是许多代谢反应进行的必须条件，是神经和肌肉等组织具有兴奋性的基础；2、如果细胞允许大量细胞外钠离子进入膜内，必然会导致过多水分子进入膜内，将引起细胞肿胀而破坏细胞的结构；3、能够建立起一种势能储备。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人钠钾泵的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人钠钾泵9.57。

由于如上所述人钠钾泵9.57蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人钠钾泵9.57蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人钠钾泵9.57蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人钠钾泵9.57以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人钠钾泵9.57的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人钠钾泵9.57的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人钠钾泵9.57的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人钠钾泵9.57的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人钠钾泵9.57的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人钠钾泵9.57异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1270-1533位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1596位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。