[发明专利]一种新的多肽——人肿瘤坏死因子受体21.45和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人肿瘤坏死因子受体21.45，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

生物体内广泛存在的一种蛋白，其作为一种中间介导物，调控着体内各种炎症反应、免疫应答反应及感染现象的发生，并可有效的作为一种抗癌剂抵抗体内一些癌症的发生。该蛋白在体内的作用活性由相关的配体及受体蛋白共同协调完成，其首先与相应的配体结合，再与受体蛋白结合以发挥其正常的生理学活性，调控体内相关生物学反应的发生及进行[Van Ostade X.，Tavernier J etal.，1994，Protein Eng，7(1)：5-22]。

肿瘤坏死因子受体在生物体内的分布亦非常广泛，这些蛋白构成了一很大的蛋白超家族，即肿瘤坏死因子受体超家族。人们已从各种不同的哺乳动物细胞中克隆得到了多个肿瘤坏死因子受体，并对这些蛋白的结构及功能进行了研究。所有这些蛋白均具有极为相似的结构特征，它们的蛋白序列中均含有保守的细胞外配体结合结构区域及细胞间效应结构区域。受体蛋白在生物体内通过蛋白与蛋白间的相互作用来传导细胞信号，以调控体内细胞的各种生理学反应，并决定相应细胞的生存与死亡[Baker S.J.，Reddy E.P.et al.，1998，Oncogene，17(25)：3261-3270]。

1999年，Hu等人从人中又克隆得到了一新的人肿瘤坏死因子受体。该受体蛋白的氨基酸序列中亦含有如上所述的保守的序列片段。其细胞外配体结合结构域中含有一个不完全的及两个完全的富含半胱氨酸的结构基序，而其蛋白序列中还含有一很大的胞质结构区域。该蛋白在生物体内的多种组织中均有表达，尤其在脑、再生组织及胚胎发育阶段高表达。该蛋白在体内调控这相关组织及细胞的分化、增殖或死亡。其突变或表达异常将导致相关细胞的发育及生长异常，进而引发各种相关的发育及代谢紊乱性疾病[Hu S.，Tamada K.et al.，1999，Genomics，62(1)：103-107]。

由上可知，肿瘤坏死因子受体在生物体内与相应的肿瘤坏死因子协同作用，以调控相关细胞的分化、增殖或死亡。该蛋白的突变或表达异常将导致体内相关细胞及组织的发育异常，进而引发各种相关的疾病。其在体内通常与多种胚胎发育紊乱性疾病、免疫系统疾病、炎症反应及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。该蛋白还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人肿瘤坏死因子受体的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人肿瘤坏死因子受体21.45。

由于如上所述人肿瘤坏死因子受体21.45蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人肿瘤坏死因子受体21.45蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人肿瘤坏死因子受体21.45蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人肿瘤坏死因子受体21.45以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肿瘤坏死因子受体21.45的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肿瘤坏死因子受体21.45的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人肿瘤坏死因子受体21.45的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人肿瘤坏死因子受体21.45的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人肿瘤坏死因子受体21.45的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人肿瘤坏死因子受体21.45异常相关的疾病的方法。