[发明专利]一种新的多肽——人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

转录与表达所必需的一种酶。在线虫中这些酶分别由12-15个独立的蛋白组成，其中含有两个很大的蛋白亚单位。在这三种多聚酶中ABC27、ABC23、ABC14.5、ABC10α及ABC10β五个亚单位是三者所共有的，而其它一些特异的亚单位是各种酶所特有的。研究发现，真核生物RNA多聚酶均具有极为相似的组成，其各组成亚单位在酶的作用活性过程中起着极为重要的作用，是细胞蛋白转录、表达及细胞生长所必需的。

真核生物RNA多聚酶的组成成分AC40及AC19两个亚单位中含有一个保守的序列片段，该序列片段与原核生物RNA多聚酶的α结构基序极为相似。研究发现，该结构基序对AC40亚单位的完整是必需的，且其在AC40亚单位的作用活性亦是必需的。该结构基序的突变或表达异常将导致多聚酶的失活或作用异常，进而影响相关细胞的增殖及生长。

RNA多聚酶各组成亚单位在生物体内的作用活性还受到多种蛋白的共同作用与调控。1993年，Dominique等人从人中克隆得到了一新的RNA多聚酶AC40亚单位调控蛋白rcp40，该蛋白在生物体内抑制AC40亚单位的作用活性。该蛋白的氨基酸序列中含有一个潜在的类似与锌指结构域的结构区域，该结构区域是蛋白与AC40亚单位结合，并调控亚单位作用活性的重要区域。该区域的突变或表达异常将导致RNA多聚酶AC40亚单位在体内的作用异常，进而影响相关蛋白在体内的转录与表达及相关细胞的增殖与生长，即引发各种相关的发育及代谢类疾病[Dominique Lalo，Christophe Carles et al.，1993，Proc Natl Acad SciUSA，90：5524-5528]。

由上可知，rcp40作为DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位的作用抑制物在生物体内具有重要的生物学活性。该蛋白在体内通过调控着AC40亚单位的作用活性来调控RNA多聚酶在体内的作用活性，该蛋白在生物体的多种组织及细胞中均有表达，其突变或表达异常将导致体内相关细胞的增殖及生长异常，进而引发各种相关的疾病。其在生物体内通常与多种组织的发育及代谢紊乱性疾病、相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。该蛋白还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13。

由于如上所述人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人DNA依赖的RNA多聚酶AC40亚单位抑制物9.13的抗体。