[发明专利]一种新的多肽——人肌球蛋白重链B22.22和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人肌球蛋白重链B22.22，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

类与肌肉收缩相关的蛋白，其在生物体内与肌肉肌动蛋白纤维相互作用，降解ATP，以获取能量完成能量的转运。肌球蛋白含有两个分子量约为200KDa的重链和四个较小的分子量约为20KDa的轻链。两条重链互相盘绕形成一个双股α-螺旋。肌球蛋白最重要的部分是S1部分，其具有ATP酶活性，同时也是和肌动蛋白分子结合的部位。肌球蛋白对肌肉收缩的调控是Ca离子依赖型的，通过水解ATP所获得的能量来完成肌肉的收缩及运动。研究发现，肌球蛋白在细胞分裂过程中也有重要的作用，其表达异常将导致细胞不能正常地进行分裂，在生殖细胞中这将影响胚胎细胞的生长与一些组织的正常分化，从而引起胚胎死亡或畸形，如：各种器官先天性发育不良；而在正常细胞中发生这一现象将直接影响细胞的增殖及表达，即影响细胞与组织的正常生长及分化，从而引发各种因发育紊乱而引起的疾病，如：癫痫、大脑麻痹、贫血、甲状腺功能减退等。

肌球蛋白重链未发现有同源分子，但骨骼肌或心肌的重链中有很多不同的异构体。这些异构体含有不同的ATP酶活性，根据其不同的肌肉类型、发育阶段及激素环境，其在发育过程中具有不同的调控机制[Masashi Yanagisawa，YoshioHamada，et al.，J.Mol.Biol.，1987，198：143-157]。另外，不仅在肌原纤维中而且在钙调机制中，平滑肌与骨骼肌或心肌均有不同的特征。有报道表明，平滑肌肌球蛋白重链分为两个分子，其中的一个为磷酸化的。研究发现，不同的肌球蛋白异构体在原癌基因形成的过程中起着重要的作用，因而，该蛋白的表达异常可能与各种肿瘤及癌症的发生相关，其表达异常会引发一些相关组织及器官的恶性疾病。

1991年，Simons等人又从人中克隆得到了一新的人肌球蛋白重链B蛋白。该蛋白在肌肉组织及非肌肉组织中均有表达，其与已知的肌球蛋白重链具有相似的结构特征。该蛋白与相应的肌球蛋白轻链结合，构成完整的肌球蛋白分子，在生物体肌肉各发育阶段起着重要的调控作用[Simons，M.，Wang，M.etal.，1991，Circ.Res.，69(2)：530-539]。其突变或表达异常将导致体内肌球蛋白作用异常，进而影响一系列相关的发育及代谢途径的发生。该蛋白在生物体内通常与癫痫、贫血、甲状腺功能减退等发育紊乱性疾病及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还棵用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌中，本发明的多肽的表达谱与人肌球蛋白重链B的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人肌球蛋白重链B22.22。

由于如上所述人肌球蛋白重链B22.22蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人肌球蛋白重链B22.22蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人肌球蛋白重链B22.22蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人肌球蛋白重链B22.22以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肌球蛋白重链B22.22的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肌球蛋白重链B22.22的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人肌球蛋白重链B22.22的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人肌球蛋白重链B22.22的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人肌球蛋白重链B22.22的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人肌球蛋白重链B22.22异常相关的疾病的方法。