[发明专利]一种新的多肽——降血钙素15.18和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——降血钙素15.18，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

降血钙素(Calcitonin)、降血钙素相关蛋白(calcitonin gene-relatedpeptide CGRP)和糖尿病相关蛋白(Islet amyloid polypeptide IAPP)在结构上都有相似性。降血钙素是一个32个氨基酸的多肽激素，通过与钙离子的结合，它可以调节血液中钙离子的浓度。(Breimer L.H.，McIntyre I.，Zaidi M.Biochem.J.255：377-390(1988))CGRP是一个138个氨基酸的多肽，在不同的脉管中均可引起血管舒展，包括冠状动脉、脑血管和全身脉管系统。IAPP是一个有138个氨基酸的蛋白，它可以选择性的抑制胰岛素刺激的葡萄糖的利用、肝糖的储存等过程。(Nishi M.，Sanke T.，Nagamatsu S.，Bell G.I.，Steiner D.F.J.Biol.Chem.265：4173-4176(1990))

在几乎所有生物的上述三种蛋白都包含有1个保守的结构域：C-[SAGDN]-[STN]-x(0，1)-[SA]-T-C-[VMA]-x(3)-[LYF]-x(3)-[LYF]，其中两个半胱氨酸由二硫键联系在一起。

以下是这三种蛋白所具有的相同的结构域的示意图：

              ****************

             xCxxxxxCxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx-NH(2)

              |     |                              Amide group

              +-----+

其中，*所示是保守的序列，C为保守的半胱氨酸。两个保守的半胱氨酸存在于这些蛋白的N末端，而这些蛋白的C末端是酰胺化的。由于此结构域的保守性，可以认为这一保守的结构域对于降血钙素、CGRP、IAPP等蛋白正常生理功能的发挥是极其重要的。

根据已有的研究，降血钙素对于血液中钙离子浓度的调节有着极其重要的意义，降血钙素可以用于治疗原因不明的婴儿高血糖症以及因甲状旁腺分泌过多而引起的成人高血钙症，此外，降血钙素对于防止骨质流失也是很重要的，降血钙素的缺失会导致骨质疏松症。(BMJ 1989 May6；298(6211)：1215-6)；(BiochemJ 1988 Oct15；255(2)：377-90)对脑和其他组织中的CGRP功能的研究发现，CGRP具有扩展血管的作用，是血液流动和血管张力的重要调控因素，此外，CGRP证明与神经系统的部分功能的调控、人细胞行为的调节、内分泌系统的调控有重要关系。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与降血钙素的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为降血钙素15.18。

由于如上所述降血钙素15.18蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的降血钙素15.18蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新降血钙素15.18蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——降血钙素15.18以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码降血钙素15.18的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码降血钙素15.18的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产降血钙素15.18的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——降血钙素15.18的抗体。