[发明专利]一种新的多肽——染色质聚集蛋白70和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——含chromo结构域的蛋白70，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

chromo结构域为一由约60个氨基酸组成的保守区域，该结构域最早在果蝇花斑修饰因子中被发现。含有该结构域的蛋白在生物体内修饰染色质以使染色质聚集形成异染色质，从而抑制一些基因的表达。在Polycomb蛋白的表达中，chromo结构域对于染色质的聚集是十分重要的，其调节着染色质的结构以抑制一些基因的表达[Paro R.，1990，Trends Genet，6：416-421]。染色质聚集形成异染色质以抑制一些基因的表达，是生物体内一种重要的蛋白表达调控过程，其可有效的控制各种蛋白在体内的表达量。

含有chromo结构域的蛋白很可能在生物体内通过与一些相关的chromo结合蛋白结合，调节遗传信息转录过程中一些正负调节因子的表达，从而调节一些相关的基因在体内的表达[Koonin E.V.，Zhou S.et al.，1995，Nucleic Acids Res，23：4229-4233]。该类蛋白在生物体内的表达异常将导致一些蛋白的表达异常，如一些蛋白过度表达及细胞的异常增殖，从而引发一系列相关的疾病。

蛋白按其所含的chromo结构域的不同情况，可分为三种不同的类型：

a)蛋白的N末端含有一chromo结构域，其后还含有一另一结构域，该结构域与chromo结构域相似，但有有所不同，称之为chromo shadow结构域。

b)蛋白含有一个chromo结构域。

c)蛋白含有一连串的chromo结构域。

研究发现，含有chromo结构域的蛋白含有如下所示的保守的一致性中心序列片段：

[FYL]-X-[LIVMC]-[KR]-W-X-[GDNR]-[FYWLE]-X(5，6)-[ST]-W-[ES]-[PSTDN]-X(3)-[LIVMC]；

对第一类蛋白，除含有chromo shadow结构域的蛋白外，其余的蛋白均含有这一保守的序列片段。而第二、第三类蛋白均含有这一保守的序列片段。该序列片段是蛋白发挥生理学功能的重要的活性区域。该区域的突变将导致蛋白在体内的表达及其调控过程的异常，从而导致一些蛋白的过度表达及相关细胞的异常增殖。该类蛋白在生物体内通常与一些发育代谢紊乱症、各种肿瘤及癌症的发生等疾病的发生相关。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与含chromo结构域的蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为含chromo结构域的蛋白70。

由于如上所述含chromo结构域的蛋白70蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的含chromo结构域的蛋白70蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新含chromo结构域的蛋白70蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——含chromo结构域的蛋白70以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码含chromo结构域的蛋白70的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码含chromo结构域的蛋白70的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产含chromo结构域的蛋白70的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——含chromo结构域的蛋白70的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——含chromo结构域的蛋白70的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与含chromo结构域的蛋白70异常相关的疾病的方法。