[发明专利]一种新的多肽——人GARP蛋白12.98和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人GARP蛋白12.98，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在生物体内存在着大量的蛋白，这些蛋白按其结构特征分为各种大的蛋白家族，同一蛋白家族的成员往往具有一个或多个保守的结构功能基序。这些结构基序在进化上高度保守，是蛋白作用的重要活性中心，通常决定着蛋白的功能。如免疫球蛋白相似的loop结构基序、富含半胱氨酸的重复序列片段、酪氨酸激酶结构域等都是一些常见的结构基序，在蛋白中决定着蛋白的作用活性。

在生物体内还存在着一类蛋白，其蛋白序列中含有保守的LRR结构基序。这类蛋白的分布非常广泛，从酵母到人中均含有该蛋白家族的成员。该结构基序为一富含亮氨酸残基的结构基序，主要涉及调控蛋白间的相互作用。含有该结构基序的蛋白在生物体内参与调控多种重要的生物学过程的发生，如细胞分化、形态发生及细胞迁徙等。研究发现，该结构基序对于蛋白在体内的作用活性是必需。

人们已从多种不同的生物体内克隆得到了多种不同的含有LRR结构基序的蛋白。1994年，Vincent等人又从人中克隆得到了一新的含有LRR结构基序的蛋白---GARP蛋白。该蛋白为一跨膜蛋白，其氨基酸序列中含有保守的富含亮氨酸残基的重复序列片段、跨膜结构域、五个潜在的糖基化位点及3’端多酰基化信号片段。其中富含亮氨酸残基的重复序列片段是蛋白相互作用的重要活性位点。上述各保守区域的突变或表达异常均将导致蛋白在体内的作用异常，进而影响体内相关细胞的分化及组织形态发生，进而引发各种相关的疾病[VincentOllendorff，Tetsuro Noguchi et al.，1994，Cell Growth & Differentiation，5：213-219]。该蛋白在生物体内通常与胚胎及成体组织发育紊乱性疾病及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人GARP蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人GARP蛋白12.98。

由于如上所述人GARP蛋白12.98蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人GARP蛋白12.98蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人GARP蛋白12.98蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人GARP蛋白12.98以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人GARP蛋白12.98的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人GARP蛋白12.98的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人GARP蛋白12.98的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人GARP蛋白12.98的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人GARP蛋白12.98的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人GARP蛋白12.98异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。