[发明专利]一种新的多肽——真核转录因子17.38和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——真核转录因子17.38，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

真核转录因子是真核基因转录必需的蛋白因子的统称。在转录过程中，真核生物RNA聚合酶需要严格依赖于一系列蛋白因子才能识别和结合到启动子特定序列上，需要一定的蛋白质组分才能启动转录反应.基因转录的组织和细胞特异性调控又需要另一些特定蛋白因子参与。目前，已经分离，纯化或鉴定的蛋白因子已有数百种。这些反式作用的蛋白因子可以分为两大类。一类是结合于启动子核心序列如TATA框及其附近的因子，称为转录因子或普遍性转录因子；另一类结合于上游调控区UPE和增强子区的蛋白因子，称为转录调控因子。这些转录因子和转录调控因子的蛋白分子，按其功能具有两种结构域，一是与DNA特异性序列结合的结构域，另一是与其它蛋白质相互作用的结构域。有的转录因子在形成起始复合物时可以结合于RNA聚合酶，但不是酶的一部分，它们是所有启动子起始转录反应的普遍性转录因子，有的参与转录的终止反应。

在真核基因开始转录的时候，需要一种多蛋白化合物与DNA的顺势作用元件相互作用。除RNA聚合酶II以外，转录开始还需要四种普遍性转录因子：BTF1(也称为TFIID)，BTF2，BTF3，BTF4。装配起始复合物的第一步是，BTF1稳定地结合到TATA盒上，在此过程中，STF起促进作用。BTF2和BTF3并不直接结合到启动子临近区域，但BTF3可以与RNA聚合酶II形成一个稳定的化合物。

BTF3是一种分子量为27K的蛋白质，在对BTF3的顺序作进一步研究的基础上，发现了两种新的蛋白质：BTF3a和BTF3b。BTF3a分子量为22K，含有206个残基，具有BTF3的一切功能；BTF3b分子量为18K，含有162个残基，它缺少BTF3a的前44个残基，可以和RNA聚合酶II结合，但没有转录活性。BTF3a与DNA结合结构域(如螺旋-转角-螺旋或锌指)和蛋白-蛋白作用结构域(如亮氨酸拉链)不同。BTF3a的N端和C端是高度亲水的，中心区域富含亮氨酸残基，高度憎水。143-154残基形成了一个短的亲脂性的α-螺旋，在螺旋的一端全部是憎水性氨基酸，其中主要是亮氨酸。这个中心憎水区域是与RNA聚合酶II结合的良好位点，其它蛋白因子如BTF2也可结合在这个位点上。一个相似的亲脂性螺旋构成旋管-旋管结构，是微管交联中与蛋白质相互作用的位点。BTF3在细胞中的含量相当微少，但在所有的细胞中均存在。BTF3是真核转录必不可少的蛋白因子，它直接结合RNA聚合酶II，使启动子进行低水平基础性转录，它可以被转录活化因子进一步激活，也可被转录抑制因子阻遏。如果缺少，单独RNA聚合酶II将导致散乱的多点起始的mRNA合成，且合成效率差。BTF3在生物体内参与决定基因在何种组织及发育阶段表达，如果BTF3的编码基因发生突变，将导致多种受BTF3调节的基因不能正常表达，从而导致多种疾病，如与胚胎发育、细胞分化有关的各种疾病等。(X.M.Zheng，et.al，Nature，1990)

本发明的多肽中含有RNA聚合酶II结合结构域，并与人转录因子BTF3在蛋白水平上具有81％的同源性，故属于人转录因子BTF蛋白家族。基于以上各点，故认为本发明的多肽为人转录因子，命名为真核转录因子17.38，并以此推断其与BTF3相似，具有相似的生物学功能。

由于如上所述真核转录因子17.38蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的真核转录因子17.38蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新真核转录因子17.38蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——真核转录因子17.38以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码真核转录因子17.38的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码真核转录因子17.38的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产真核转录因子17.38的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——真核转录因子17.38的抗体。