[发明专利]一种新的多肽——人蛋白酪氨酸磷酸酶36.52和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人蛋白酪氨酸磷酸酶36.52，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

进化依赖于细胞之间的相互通讯联系。由于细胞间存在着精细的分工，一些细胞群体有赖于其他细胞群体，并要求其他的细胞群体对其产生应答反应。这种精巧的细胞间通讯网络可以控制细胞的生长、分裂、死亡、分化形成组织以及各种其他的生命过程。从高等动物的通讯的重要性和复杂性来看，很可能有机体中相当的一部分基因参与了这个过程。

细胞的化学信号因子可分为亲脂性和亲水性两种。其中亲水性的信号分子包括神经递质、生长因子、细胞因子等。它们不能穿过靶细胞质膜的双脂层，仅能于细胞表面上的特殊受体结合，通过信号转导机制，在细胞内产生第二信使激活蛋白激酶或蛋白磷酸酶的活性。而第二信使很快改变靶细胞中的酶的活性或非酶蛋白的活性，引起细胞对外界信号的反应。

一些生长因子与其相应的受体结合后，活化受体本身的酪氨酸蛋白激酶，激酶再磷酸化靶蛋白的酪氨酸残基，再通过一系列磷酸化的级联反应，影响基因的表达。而这一过程的逆过程，即酪氨酸的去磷酸化，则是由蛋白酪氨酸磷酸酶(Protein tyrosine phosphatases，PTPases)催化完成的。蛋白酪氨酸磷酸酶和酪氨酸蛋白激酶共同调控着细胞的活性、增殖和分化。

PTPase存在于细胞质中，同时也有细胞膜上的，受体类的PTPase。在人的cDNA库中发现了几种受体类的PTPase。它们包括：白细胞公共抗原LCA(leukocyte common antigen)，HPTP α、β、γ、δ、ε和ζ。α和ε在细胞质内的部分是高度同源的。而胞外的部分则不与其他已知基因同源[EMBO J，1990，9(10)：3241-52]。

蛋白酪氨酸磷酸酶可以终止由酪氨酸蛋白激酶所激活的信号传导通路，清除上一次的刺激信息，使这一通路能够接收下一次的信号。现在已知有8中生长因子的受体属于这类信号通路：表皮生长因子受体、血小板生长因子受体、趋化细胞集落生长因子受体、胰岛素受体、类胰岛素生长因子受体、肝细胞生长因子受体、神经生长因子受体和血管内皮生长因子受体。蛋白酪氨酸磷酸酶的突变或表达异常将导致生长信号不断的刺激，造成细胞生长失控而导致肿瘤的发生。

1996年，Kim等人又从人中克隆得到了一新的蛋白酪氨酸磷酸化酶。该蛋白与已知的各种蛋白酪氨酸激酶具有相似的结构及功能特征。其在生物体内亦与相关的酪氨酸蛋白激酶协同作用，参与调控相关蛋白的磷酸化及去磷酸化作用，以调节体内各种相关的代谢途径的发生与进行。该蛋白的突变或表达异常将导致体内相关信号及代谢途径的异常，进而引发各种相关的疾病[Kim Y.W.，Wang H.etal.，1996，Oncogenel3(10)：2275-2279]。由上可知，该蛋白酪氨酸酶在生物体内与相关组织的发育紊乱性疾病、多种组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌中，本发明的多肽的表达谱与人蛋白酪氨酸磷酸酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人蛋白酪氨酸磷酸酶36.52。

由于如上所述人蛋白酪氨酸磷酸酶36.52蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人蛋白酪氨酸磷酸酶36.52蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人蛋白酪氨酸磷酸酶36.52蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人蛋白酪氨酸磷酸酶36.52以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白酪氨酸磷酸酶36.52的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白酪氨酸磷酸酶36.52的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人蛋白酪氨酸磷酸酶36.52的方法。