[发明专利]一种新的多肽——人锌指蛋白21.56和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人锌指蛋白21.56，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在真核生物体内存在着很大一类蛋白，它们的蛋白序列中均含有一个至多个锌原子结合结构域，这类蛋白在生物体内参与各种蛋白与核酸、蛋白与蛋白间的相互作用，它们通常作为转录因子及信号传导分子参与相关组织基因的表达与调控，这类蛋白构成了一个很大的蛋白家族，被称为锌指蛋白。在人的基因组中约含有300到700个锌指蛋白，这些锌指蛋白在生物体内与核苷酸结合，发挥着许多重要的生物学功能，最重要的作用就是调节基因的转录与表达。研究发现，锌指蛋白在不同生物的各种组织中均有表达，这些组织包括造血细胞、脑、神经系统、各种与肿瘤相关的组织和无限增殖细胞系组织等。其在这些组织的基因转录与表达过程中起极为重要的调控作用。

锌指蛋白的锌指结构主要有以下几种：C2H2构型、C2C2构型、C2HC构型、C2HC4C构型、C3H构型、C3HC4构型(Dai KS et al.，1998)。其中含C2H2构型的锌指蛋白基因构成人类基因组最大的一族基因(Berker et al.，1995)。近些年，人们已从酵母、果蝇、鼠及人等多种生物体中分离得到了各种构型的锌指蛋白，并对这些锌指蛋白的生物学功能及其染色体定位等进行了深入地研究。C2H2型锌指蛋白与基因的转录活化及抑制有关，这些蛋白的表达异常将引发各种发育紊乱性疾病、各种肿瘤的发生、各种遗传性疾病及免疫系统疾病[KamalChowdhury，Heidi Rohdewohld et al.，Nucleic Acids Research，1988，16：9995-10011]。

C2H2型锌指蛋白的蛋白序列中均含有下列保守的序列特征：(Tyr，Phe)-X-Cys-X(2，4)-Cys-X3-Phe-X5-Leu-X2-His-X(3，5)-His(其中X表示任意氨基酸残基；半胱氨酸与组氨酸与锌原子形成配位键，结合锌原子；其它三个保守的氨基酸残基形成疏水性中心区域；其它变化的氨基酸残基负责介导蛋白与其它分子的相互作用)。一个C2H2型锌指蛋白可能含有一个或多个如上所述的锌指结构域，这些结构域在生物体内独立完成自己的生理学功能。在很多情况下，含有锌指结构域的蛋白与特殊的双链及单链DNA序列相互作用，起着转录调节因子的作用。现有研究发现，C2H2类型的锌指结构域不仅在一些组织的基因表达过程中起重要的调节作用，其在生物体的发育调节过程亦起着非常关键的作用。

人们已从各种不同的生物体内克隆得到了多种C2H2型锌指蛋白家族中的成员。1999年，Platzer等人又从人中克隆得到了锌指蛋白ZNF92，该蛋白亦含有如上所述的C2H2型锌指蛋白家族的特征性锌指结构基序，其为C2H2型锌脂蛋白家族的新成员，并与该蛋白家族中的其它成员具有相似的结构及功能特征。该蛋白在生物体内参与调控多种相关组织的基因的转录与表达，其突变或表达异常将直接影响相关的基因在体内的表达，进而引发各种相关的发育及代谢紊乱性疾病。该蛋白在生物体内通常与一些胚胎发育紊乱性疾病、神经系统疾病、免疫系统疾病及相关组织的恶性紊乱性疾病，如肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。

本发明的蛋白与已知的人锌指蛋白92在蛋白水平上具有99％的同一性和100％的相似性，且蛋白序列中亦含有保守的C2H2型锌指蛋白家族的特征性序列片段。由此认为，其为人C2H2型锌指蛋白家族的新成员，命名为人锌指蛋白21.56。该蛋白在生物体内亦参与调控多种基因的转录与表达，其突变或表达异常与胚胎发育紊乱性疾病、神经系统疾病、免疫系统疾病、相关组织的肿瘤及癌症等的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

由于如上所述人锌指蛋白21.56蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人锌指蛋白21.56蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人锌指蛋白21.56蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人锌指蛋白21.56以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人锌指蛋白21.56的多核苷酸的重组载体。