[发明专利]一种新的多肽——人RNA结合蛋白P22.66和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人RNA结合蛋白P22.66，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

真核细胞的基因，无论rRNA基因、tRNA基因、各种mRNA基因，大多数为不连续基因，初始转录产物都要经过剪接加工成有活性的RNA。转录初始产物hnRNA中，RNA聚合酶II把基因的内含子和外显子一起转录成RNA序列，在细胞核内hnRNA被剪接成成熟mRNA。

无论哺乳动物或酵母mRNA的剪接只有在形成剪接体后才能进行。剪接体包括mRNA前体在内的多组分复合物，由细胞核小分子RNA(snRNA)和蛋白因子组成。剪接体的亚单位是细胞核小分子核糖核蛋白颗粒(snRNP)。剪接的第一步是在U4/U5 snRNP和U5 snRNP存在下，U1 snRNP与5′剪接点结合，使其磷酸基转移到U2 snRNP结合的分枝点上突起A的2′-OH上，形成带2′，5′-磷酸二酯键的转酯化合物(或称套索RNA结构)；第二步是剪接反应，首先在内含子左侧切断，5′外显子作为单独的片段释放，内含子-3′外显子在分枝A上通过。5′-2′链形成套索结构，然后3′剪接点切断，形成套索内含子，5′与3′外显子连接。

P54 ^nrb(nuclear RNA-binding protein，54kDa)参与剪接的第二步反应。P54^nrb是一种基础蛋白，不含有任何转录后修饰，它的N端富含His，Pro和Gln残基。P54^nrb含有两个连续的RNA识别结构域(RRMs)，足以证明它是一种RNA结合蛋白。P54^nrb含有一个动植物种类史上相当保守的DBHS结构域(Drosophila behavior andhuman splicing)，这一结构域存在与hnRNP和snRNP聚多肽中。P54^nrb作为剪接因子，影响蛋白间相互作用，与视敏锐有关。(Benhao Dong，et.al，Nucleic AcidsResearch，1993，Vol.21，No.17 4085-4092)

本发明的人的基因与人RNA结合蛋白基因P54^nrb在蛋白水平上有55％的同源性。且两者均含有RNA结合蛋白的特征结构域RRMs和DBHS。基于以上各点，故认为本发明的新基因为RNA结合蛋白基因，命名为{人RNA结合蛋白P22.66}。并以此推断其与P54^nrb相似，同为RNA结合蛋白家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人RNA结合蛋白P22.66蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人RNA结合蛋白P22.66蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人RNA结合蛋白P22.66蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人RNA结合蛋白P22.66以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人RNA结合蛋白P22.66的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人RNA结合蛋白P22.66的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人RNA结合蛋白P22.66的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人RNA结合蛋白P22.66的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人RNA结合蛋白P22.66的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人RNA结合蛋白P22.66异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；