[发明专利]一种新的多肽——人高尔基体－溶酶体膜泡运输蛋白67.87和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在细胞内，分泌型蛋白、多数细胞质膜的膜蛋白都是在粗面内质网上合成，经高尔基体的加工和分装通过膜泡运输的方式输送到细胞表面或者溶酶体等细胞器。高尔基体在细胞内的主要功能是将内质网合成的多种蛋白质进行加工、分类与包装，然后分门别类地运送到细胞特定的部位或分泌到细胞外，因此，它是细胞内大分子运输的主要交通枢纽，运送过程主要通过膜泡的运动来实现。

从高尔基体到溶酶体膜泡运输过程是一个十分复杂的过程，在酵母中就至少发现25种以上与膜泡运输有关的基因，包括Sec1p、Vps33p、Vps45p等。目前已经找到的Vps33p的哺乳动物同族体包括鼠的vps33a(r-vps33a)和鼠的vps33b(r-Vps33b)以及人的Vps45p(h-Vps45p)，类似于酵母细胞中的Vps45p。这三种哺乳动物蛋白参与高尔基体和溶酶体之间的膜泡蛋白运输，和酵母中类似蛋白的功能相同。

在酵母膜泡运输有关蛋白中，Sec1p、Vps33p、Vps45p和Slylp等组成了一个蛋白家族，与酵母分泌的特定阶段上膜泡的运输机制有关。Sec1p的哺乳动物同族体也已经发现，包括n-Sec1，它能够调节接合膜泡与神经末端的连接(Hataetal.，1993；Garcia et al.，1994；Pevsner et al.，1994a，b)，另外还有鼠的r-vps33a和r-vps33b。这些人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白的发现为高尔基体和溶酶体之间的膜泡运输的研究提供了工具，蛋白向溶酶体的运输会由于神经变性失常而被打断，导致的疾病比如阿尔茨海默氏病(Alzheimer’sdisease，进行性老年痴呆症)，以及由朊病毒引起的脑疾。膜泡对独特的细胞内代谢区域的专门化运输导致了该家族的蛋白在进化过程中产生一定的差异。采用Northern分析，发现这些基因在所有的机体组织中都有表达(脑、肺、肝、骨骼肌、肾、睾丸等)，r-vps33b的转录产物长度在各种组织中都为2.8Kb，而另外有一些vps基因在各种组织中会产生不同长度的转录产物。

本发明的多肽与上述的膜泡运输蛋白Vps33b有96％的相同性，98％的相似性，并且包含膜泡运输蛋白家族特征性的保守序列，因此认为此蛋白是一种新的膜泡运输蛋白，具有与膜泡运输蛋白Vps33b相似的生物学功能，并命名为人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87。

由于如上所述人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；