[发明专利]一种新的多肽——人发泡相关蛋白Sec31－35.20和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人发泡相关蛋白Sec31—35.20，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

酵母COPII(coat protein II)是一个与内质网(endoplasmic reticulum，ER)产生小泡有关的一个蛋白家族。内质网是大部分细胞器以及质膜的跨膜蛋白及脂类合成的场所。几乎所有外分泌的蛋白质及那些注定到内质网、高尔基器和溶酶体腔的蛋白质开始时也送到内质网腔。内质网对糖类代谢，解毒作用有密切关系。如果COPII蛋白基因发生突变，会导致内质网-高尔基体之间的运输发生障碍，蛋白分泌受阻，致变致癌物积累。

目前，发现在酵母中有3种成分与内质网囊泡形成有关：Sar1p，Sec23p-Sec24p复合物和Sec13p-Sec31p复合物，这些蛋白均为COPII蛋白成员。在COPII发泡开始，小分子GTPase Sarlp首先募集到内质网膜上，Sec13p-Sec31p其次被Sar1p募集到膜上，形成Sar1p-Sec13p-Sec31p，它对囊泡的包被有关。接下去，含有WD-40重复的Sec13p-Sec31p被募集上来，这导致囊泡形成。

人Sec31A属于COPII家族，与Sec31p具有26％的同源性。Sec31A含有1218个氨基酸，它在N端有5个WD-40或WD-40-like重复，在靠C端的一边含有一个富含脯氨酸残基的区域。Sec31A基因在人体各组织内广泛转录与表达。Sec31A只存在于囊泡状结构中，它极少分散在细胞中，而是大量集中在细胞核周区域中。Sec31A对内质网-高尔基体之间的运输起着重要作用。当Sec31A受到C端180氨基酸融合蛋白或抗体作用时，VSVG在内质网-高尔基体之间的运输受到抑制。(Membrane Biology Laboratory，The Journal of Biological Chemistry，Vol.275，No.18，13597-13604)

本发明的人的基因与人发泡相关蛋白基因Sec31A在蛋白水平上有95％的同源性。且两者均含有Sec31蛋白家族的特征性结构域——N端的WD-40重复。基于以上各点，故认为本发明的新基因为Sec31基因，命名为{人发泡相关蛋白Sec31—35.20}。并以此推断其与Sec31A相似，同为Sec31蛋白家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人发泡相关蛋白Sec31—35.20蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人发泡相关蛋白Sec31—35.20蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人发泡相关蛋白Sec31—35.20蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人发泡相关蛋白Sec31—35.20以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人发泡相关蛋白Sec31—35.20的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人发泡相关蛋白Sec31—35.20的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人发泡相关蛋白Sec 31—35.20的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人发泡相关蛋白Sec31—35.20的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人发泡相关蛋白Sec31—35.20的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人发泡相关蛋白Sec31—35.20异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少96％相同性的多核苷酸。