[发明专利]一种新的多肽——磷脂酸磷酸酶29.81和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--磷脂酸磷酸酶29.81，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

磷脂酸(PA)和二脂酰甘油(DG)在信号传导和细胞膜脂类的生物合成过程中有重要作用，磷脂酸磷酸酶(PAP)的作用是将PA催化生成DG，PAP有两种，PAP1和PAP2，PAP1被认为是与细胞质和细胞膜都有关，PAP2是一个完全的膜蛋白。PAP2-alpha 1和PAP2-alpha2是可选择性的同一PAP2基因编码出的两种形式。(DNA Cell Biol 1998 Apr；17(4)：377-85)

已发现PAP2有三种不同的同工结构，分别称为PAP2a，PAP2b，PAP2c。它们的结构，包括糖基化位点、跨膜的功能域、酶催化位点等已有了一定程度的阐述，具体请参阅相关文献。(FEBS Lett 1998 May 8；427(2)：188-92)

已有的实验从鼠的体内克隆到了35KD的PAP2。也已证明，同工的人磷脂酸磷酸酶(PAP2)已发现三种，2a，2b，2c。这些酶都有6个跨膜的功能域，而这些酶的催化位点也被初步定于酶的第二和第三个细胞外LOOP结构之间，PAP2属于一大类可溶性的膜结合酶。体外实验的结果证明，PAP2可以脱去以下底物的磷酸，包括可溶性磷脂酸、神经酰胺-1-磷酸盐、神经鞘氨醇-1-磷酸盐和二脂酰甘油焦磷酸脂等。PAP2有很广泛的底物特异性，但具体的研究还有待进一步完善，PAP2显示有调控来源于丙三基或鞘类磷脂等脂类代谢的功能。(Chem Phys Lipids1999 Apr；98(1-2)：119-26)

磷脂酸磷酸酶(PAP)的主要功能是将磷脂酸脱去磷酸形成二脂酰甘油，因此调控甘油脂类的合成、细胞信号传导等过程。磷脂酸磷酸酶(PAP)是一种在脂类代谢过程中有重要作用的酶类，其底物和产物(磷脂酸和二脂酰甘油)是作为第二信使在生物的信号传导过程中起作用。通过诱变编码PAP的基因的方法，我们发现突变后的细胞发生了在细胞分裂时期的细胞形状不正常，细胞生长不正常、细胞质移动不正常。因此，可以认为PAP在细胞生长、细胞质移动等过程中有重要的作用。(Biochem Biophys Res Commun.1998 Jul 9；248(1)：87-92)

Northern杂交的结果显示，在一些肿瘤组织中PAP2的表达被抑制，特别是一些来源于初级消化道的组织中，这一现象特别明显。因此，可以推断PAP2及其编码基因可用于一些肿瘤的治疗。(DNA Cell Biol 1998 Apr；17(4)：377-85)

也有研究表明，PAP2在前列腺细胞中能起到男性激素的调控作用，因此可用于治疗前列腺的相关疾病，例如前列腺癌等等。(J Biol Chem 1998 Feb20；273(8)：4660-5)；(PAP-2a；Kai.，M.，Wada，I.，Imai，S.-i.，Sakane，F.，and Kanoh，H.(1997)J.Biol.Chem.272，24572-24578)

还有研究发现，PAP2与生殖细胞的移动、上皮组织细胞的分裂等过程有关系，并可能在上述过程中起重要的调节作用。(Biochim Biophys Acta 1997 Sep4；1348(1-2)：56-62)

在对鼠的研究中，我们发现磷脂酸磷酸酶(PAP)与鼠的肥胖程度有一定关系。但是，对正常人的脂肪组织和病态肥胖的人脂肪组织中的磷脂酸磷酸酶(PAP)进行对照研究，结果显示导致人肥胖的甘油三脂的过度合成与磷脂酸磷酸酶(PAP)的活性高低并没有明显的关系。(Lipids 1989 Dec；24(12)：1048-52)

对人正常和营养缺乏的肌肉组织的活体切片检查的结果表明，与正常组织相比在营养缺乏组织中的磷脂酸磷酸酶(PAP)在微粒体中的表达要低很多，而在细胞质和线粒体中的表达要高很多。(Clin Chim Acta 1985 Mar15；146(2-3)：167-74)

本发明人的多肽与磷脂酸磷酸酶(PAP)在氨基酸水平上分别有36％和57％的相同性与相似性，并具有相似的结构特征，同属于磷脂酸磷酸酶蛋白家族，故命名为磷脂酸磷酸酶29.81，同时推测其具有相似的生物学功能。