[发明专利]一种新的多肽——二肽氨基肽酶Ⅳ相关蛋白(DPPX)52.14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)与二肽氨基肽酶IV(DPPIV)的氨基酸序列具有高度的一致性，但DPPX却没有任何氨基肽酶活性。DPPIV是一功能性的丝氨酸肽酶，从多肽的氨基端切割二肽Xaa-Pro，其活性中心由丝氨酸、天冬氨酸、组氨酸组成催化三联体，在反应过程中三者通过氢键形成电荷中继系统，从而加快反应进程。在DPPX中，该催化三联体的第一个丝氨酸残基不保守，可由天冬氨酸替代，这可能是导致DPPX不具氨基肽酶的活性的原因。

1993年，Noboru Yokotani等人克隆出人的DPPX的cDNA，其表达蛋白DPPX-S和DPPX-L具相同的跨膜结构域，以及一个定位有催化三联体的C端胞外结构域，但它们的N端胞质结构域长度等有较大差异。DPPX的膜拓扑结构和多功能跨膜肽酶(如：DPPIV)相似。DPPX与肝细胞基质的粘着、免疫细胞中作为细胞表面标记的跨膜信号、CD26、肠的微绒毛和肾脏的毛细血管的肽吸收等生理过程相关。在肝细胞中，DPPIV与胞外基质的相互作用不包括DPPIV的催化位点。人类二肽氨基肽酶由7号染色体上的DPPX基因编码，DPP基因是一单拷贝基因，其基因位点并非串列于哺乳动物基因组中，DPPX和DPPIV基因序列具高度同源性，它们可能来自同一个祖先基因，DPPX缺乏重要的功能性氨基酸可能是蛋白酶分子进化的结果。[Hum Mol Genet 1993 Jul；2(7)：1037-9]

DPPX基因主要在哺乳动物大脑中表达，与DPPIV密切相关，DPPX基因的正常表达与大脑功能有密切关系，若表达异常会导致异常神经细胞迁移，而引起神经传导的病理性缺陷，从而引起一系列神经系统疾病。此外，该基因在神经系统相关疾病的诊断和治疗中也有一定作用。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌中，本发明的多肽的表达谱与二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14。

由于如上所述二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与二肽氨基肽酶IV相关蛋白(DPPX)52.14异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。