[发明专利]一种新的多肽——人微管结合蛋白－1B(MAP－1B)43.34和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

微管是一种管状纤维，由α和β管蛋白及少量微管结合蛋白聚合而成，具有重要的功能，如：纤毛、鞭毛运动，细胞内运输，染色体运动等。微管结合蛋白可分为高分子量及低分子量两种，高分子量类(200-300KD)主要包括MAP-1和MAP-2，低分子量主要为tau蛋白(55-62KD)。MAP多肽链由两个区段组成，一个区段是微管结合区，另一区段以横桥方式与其它微管纤维连接，协助微管联结其它细胞组分。MAP可促进微管的组装，抑制其解聚，具有稳定微管的作用。MAP是信号传导中的一个靶物，它也是细胞周期调节的一个重要引擎分子cdc-2激酶的靶物。许多类型细胞在其特化的胞质中具有稳定的微管，在神经细胞的轴突和树突中尤其多，其中神经细胞体和树突中含丰富MAP-1。MAP-1是一分子量为320KD的蛋白质，在神经细胞骨架的维持中具重要意义。

1991年Brzustowicz LM等人克隆出人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)的cDNA，它定位在人5号染色体q13区域，接近脊椎肌萎缩(SMA)位点。SMA是一种退化性疾病，首先影响神经电传导系统，随后破坏α-自主神经而引起骨骼肌的萎缩。急性和慢性肌萎缩基因分别定位于5号染色体q13和q14区域。MAP-1B的分子量为7.5KD，它是一柔韧的纤维分子，是微管和神经细胞其它骨架的交联桥的组成部分，它在活跃生长的神经细胞中含量丰富，但在成熟神经细胞中含量明显降低，因而可能与神经突触生长及其可塑性有关，它的异常可能与神经细胞发育及其结构异常相关。MAP-1B的定位及其在神经系统形成中的作用显示MAP-1B可能与SMA有关。[Proc Natl Acad Sci USA 1991 Sep 1；88(17)：7873-6]

微管结合蛋白能促进微管的组装，维持微管的运动、物质运输等功能，对于生物体十分重要。MAP-1B广泛分布于生物体各组织，在神经细胞中含量更高，对于维持树突、轴突的神经传递作用有较大影响，若异常表达，将导致神经系统疾病，可能引起SMA疾病，破坏生物体的正常生命活动。此外，MAP-1B对于上述相关疾病也有一定的诊断和治疗作用。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌中，本发明的多肽的表达谱与人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34。

由于如上所述人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人微管结合蛋白-1B(MAP-1B)43.34异常相关的疾病的方法。