[发明专利]一种新的多肽——人帽子结合蛋白14.08和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人帽子结合蛋白14.08，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在真核生物中，几乎全部的成熟mRNA都具有5’帽子结构，且大部分成熟mRNA还同时具有3，多聚A尾巴。这是真核生物mRNA的重要特点。不同真核生物的mRNA具有不同的帽子，同一种真核生物也常具有不同的帽子。体外翻译试验表明，5’帽子结构对相关蛋白的翻译是必需的。缺少5’帽子的mRNA，不能进行有效的翻译。由此可知，5，帽子结构在蛋白的翻译过程中起着极为重要的作用。其为核糖体对mRNA的识别提供了信号，从而决定了蛋白在细胞内的翻译。近年来研究发现，该识别及调控过程还涉及多种相关蛋白的协同作用，如帽子结合蛋白等。

人们已从兔及人等多种不同的生物体内克隆得到多种帽子结合蛋白，并发现所有这些蛋白均具有较高的同源性，它们均具有相似的结构及功能特征。198 7年，Rychlik等人又从人中克隆得到了一新的帽子结合蛋白，该蛋白亦在细胞内参与调控多种重要的蛋白翻译过程。其通过与相应的成熟mRNA的5’帽子结构结合，以调控核糖体对mRNA的识别，进而促进细胞内蛋白翻译过程的正常完成。该蛋白的突变或表达异常将导致细胞内相关蛋白的翻译及表达异常，进而引发各种相关的疾病[Rychlik W.，Domier L.L.et al.，1987，Proc Natl Acad SciU.S.A.，84(4)：1148]。

由上可知，帽子结合蛋白在生物体蛋白的翻译及表达过程中起着极为重要的调节作用。其通过与相应成熟mRNA的5’帽子结构结合，以调控核糖体与mRNA正常结合，进而促进蛋白翻译过程的完成。其突变或表达异常将导致体内相关蛋白的翻译异常，进而引发各种相关的疾病，如胚胎发育异常、相关组织的肿瘤或癌症等。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌中，本发明的多肽的表达谱与人帽子结合蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人帽子结合蛋白14.08。

由于如上所述人帽子结合蛋白14.08蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人帽子结合蛋白14.08蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人帽子结合蛋白14.08蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人帽子结合蛋白14.08以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人帽子结合蛋白14.08的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人帽子结合蛋白14.08的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人帽子结合蛋白14.08的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人帽子结合蛋白14.08的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人帽子结合蛋白14.08的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人帽子结合蛋白14.08异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。