[发明专利]一种新的多肽——人golgin－84蛋白11.88和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人golgin-84蛋白11.88，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

高尔基体囊腔组成了一个区域化和极化的结构，使翻译后的处理酶能够连续工作。作为路径中心，高尔基体接受来自内质网的蛋白，并把它们装进小泡，发送到质膜或特定地送到内涵体和溶酶体中。在极化了的细胞中，还有一些其它路径，包括发送到顶端或嗜碱侧生质膜或储藏颗粒。

高尔基体中含有多种蛋白质，所有的高尔基体常驻蛋白都是外膜或整膜蛋白，它们都具有卷曲—螺旋结构(coiled-coildomain)。在高尔基体细胞质面得到的拥有卷曲-螺旋结构的蛋白具有不同的功能。C端固膜蛋白具有细胞质卷曲-螺旋结构，将运输管道与囊腔膜相连，另一种蛋白SNARES将特殊管道插入膜。在高尔基体表面上的外围卷曲-螺旋蛋白参与维持高尔基体结构，发泡，运输，定位和导管连接等。还有一些蛋白是自体免疫疾病的抗原。

通过酵母荧光试验，用存在于人勒韦氏综合症中的外围高尔基磷脂酰肌醇(4，5)P2 5-磷酸酶OCRL1作诱饵，分离出了golgin-84。golgin-84 mRNA长2.8Kb，在睾丸中广泛存在和表达，而在其它组织中含量低得多。golgin-84含有731个氨基酸残基，分子量为83kDa。golgin-84是一种常驻高尔基体的整膜蛋白，它的C端附近具有一个单一的穿膜结构域，属于C端固定类型II整膜蛋白，翻译嵌入膜。在体外，golgin-84翻译后，通过C端细胞质和N内腔定位，嵌入微粒体膜。

golgin-84可合成二聚物，N端附近的497个残基二聚形成卷曲-螺旋结构域，golgin-84二聚物能够激活RET-II致癌基因，当其结合RET tyr激酶结构域后，可将其激活。golgin-84与giantin的结构顺序相当相似，可能具有将运输管道与靶膜相连的功能。(JBC，1999，Bascom，et al)

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv 304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌中，本发明的多肽的表达谱与人高尔基体结构蛋白golgin的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人golgin-84蛋白11.88。

由于如上所述人golgin-84蛋白11.88蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人golgin-84蛋白11.88蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人golgin-84蛋白11.88蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人golgin-84蛋白11.88以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人golgin-84蛋白11.88的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人golgin-84蛋白11.88的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人golgin-84蛋白11.88的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人golgin-84蛋白11.88的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人golgin-84蛋白11.88的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人golgin-84蛋白11.88异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；