[发明专利]一种新的多肽——锌指蛋白41(ZNF41)58.74和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——锌指蛋白41(ZNF41)58.74，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

锌指蛋白为编码锌离子介导的核苷酸结合蛋白多基因家族中的成员，锌指蛋白按其结构特征又可分为各种不同的家族。人们已从酵母、果蝇、鼠及人等多种生物体中分离得到了各种类型的锌指蛋白。果蝇Kruppel基因类似的锌指蛋白分布最为广泛，且在生物体内有着重要的生物学功能。这些基因均含有锌指蛋白的特征性连续重复的C2-H2锌指蛋白结构域。研究发现，这些蛋白与基因的转录活化及抑制有关，这些蛋白的表达异常将引发各种发育紊乱性疾病、各种肿瘤的发生、各种遗传性疾病及免疫系统疾病[Kamal Chowdhury，Heidi Rohdewohld etal.，Nucleic Acids Research，1988，16：9995-10011]。

所有的锌指蛋白Kruppel家族的成员均含有28-30个氨基酸长的保守的指重复序列(F/Y)XCXXCXXXFXXXXXLXXHXXXHTGEKP，其中一些特定的氨基酸残基位点为高度保守的。这一序列在很多不同的锌指蛋白中均含有多个拷贝，其拷贝数不同(锌指个数不同)则功能也不同。锌指蛋白与不同长度的DNA的结合依赖于指结构的数量，多指结构可能与复合物的结合稳定性有关，而复合物是RNA聚合酶转录的作用位点。研究发现，许多锌指蛋白的锌指结构域相互连接区域也是高度保守的，这一区域通常含有下列序列：His-Thr-Gly-Gly-Lys-Pro-(Tyr，Phe)-X-Cys，其中组氨酸与半胱氨酸为金属离子的结合位点，而X为可变氨基酸残基。这一区域对于锌指结构的形成是必需的，指结构的数量将直接影响锌指蛋白与不同长度的DNA结合，且多指结构与复合物的结合稳定性有关[Jeremy M.Berg，Annu.Rev.Biophys.Chem，1990，19：405-421]。

ZNF41属于人锌指蛋白基因簇，它位于染色体Xp11.23中富含基因的区域(Derry JMJ，Genomics 30：361-365.1995)，它编码一个KRAB/FPB(kruppel-associated/finger preceding box)区域——一个存在于脊椎动物的锌指蛋白基因中的有效的转录抑制基元。含有TFIIIA/KRüPPEL C2H2指基元的锌指蛋白作为一个结合蛋白质的核酸大家族出现(Pieler Tand Bellefroid E，Mol Biol Rep20：1-8，1994)。这个ZFP亚家族成员现在被认为一个潜在的转录抑制子集团，它涉及到基因表达的调节路径。ZNF41的表达受到激活的X染色体的限制，所以它服务于不被激活的X染色体。ZNF41在对位于染色体X中的基因的依赖于激活和非激活的染色体X的表达形式中起着区域协调作用。(Miller.AP，and WillardHF.Proc natl Acad Sci，USA 95：8709-8714，1998)

本发明的人的基因与人锌指蛋白Kruppel家族中的成员ZNF41在蛋白水平上有45％的同一性及61％的相似性。且两者的蛋白序列均含有人锌指蛋白亚家族中的KRAB蛋白。基于以上各点，故认为本发明的新基因为人锌指蛋白Kruppel家族的新成员，并以此推断其与ZNF41相似，同为人锌指蛋白Kruppel家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述锌指蛋白41(ZNF41)58.74蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的锌指蛋白41(ZNF41)58.74蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新锌指蛋白41(ZNF41)58.74蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——锌指蛋白41(ZNF41)58.74以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码锌指蛋白41(ZNF41)58.74的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码锌指蛋白41(ZNF41)58.74的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产锌指蛋白41(ZNF41)58.74的方法。