[发明专利]一种新的多肽——与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人类白血病及淋巴瘤等疾病中常发生染色体易位现象，易位是指染色体区段的交换，包括由两近端点着丝粒染色体的着丝粒融合及相互易位。前者当产生配子时，产生染色体数目偏差，后者的携带者可形成具有不平衡的染色体组的配子。免疫球蛋白(Ig)/T细胞受体(TCR)重组酶以及其它靶序列在染色体重组中起重要作用，染色体1p32、8q24、18q21、14q11(TCR Vδ3位点)和14q32(Ig DH位点)的重组热点区域具同一序列：ATGCAG和GCCC[A/T][G/C][G/C][A/T]。

1995年Katsunori Aoki等人克隆出一新的基因——Translin基因，它由ReHF-1和BCLF-1基因组成。该基因由2.7kb组成，其终止密码子(TAG)位于228位的Lys的下游、多聚腺苷酸(Poly A)信号的上游。该基因中，GCAGA[A/T]C和CCCA[C/G]GAC替代了Ig/TCR重组酶的断裂连接位点。该基因仅定位于具Ig、TCR重组位点的淋巴细胞核，可能在DNA修复、复制、重组中起重要作用。其表达产物与已知的类似蛋白不同，由228个氨基酸组成，分子量为26180Dal。它由两条链组成，每条链都由一“亮氨酸拉链”组成，通过二硫键连接。它含有7个疏水氨基酸组成的重复序列(其中5个是Leu，一个是Val)，横跨10个α-螺旋，每个螺旋的反面富含极性或非极性的氨基酸链，这些氨基酸链由“亮氨酸拉链”组成，但其上游并没有“螺旋-环-螺旋”结构。该蛋白的亚结构是一环状的八聚体，在进化过程中高度保守。重组热点结合因子(ReHF-1)在染色体8q24和1p32的断裂结合位点与信号序列特异性结合，另一类似于ReHF-1的蛋白—BCLF-1，特异性地和淋巴肿瘤患者携带的t(8；14)(p32；q11)易位中致癌基因Bc1-2的靶序列的成簇断裂位点结合，重组热点区域的结合活性在淋巴肿瘤的染色体易位中起重要作用。ReHF-1和BCLF-1蛋白具很高的同一性，相似的分子量(27KD)，并竞争同一靶序列，它们在人类淋巴恶性肿瘤中能识别各种染色体易位的相似的断裂结合位点。[Nature Genetics，1995，10：167-174]

染色体畸变会引起各种疾病，相互易位产生的配子在减数分裂后期分离时，会出现相互分离，配子可能会接受部分重复的染色体区段，根据受累染色体的区段不同，可产生不同的疾病类型。Translin蛋白在染色体易位方面有重要作用，若异常，会产生各种遗传疾病，严重危害人类健康。此外，它在上述各种疾病的诊断、治疗方面也有一定作用。

通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、O.5％FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本发明的多肽的表达谱与与染色体易位相关的热点结合蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84。

由于如上所述与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——与染色体易位相关的热点结合蛋白59.84的抗体。