[发明专利]一种新的多肽——脯氨酸富含蛋白86.90和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——脯氨酸富含蛋白86.90，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

小鼠前列腺分泌的脯氨酸富含多肽(PRPs)组成了一群异源基因性的38个氨基酸残基组成的肽段，这群肽段与前列腺结合蛋白(PBP)的化学计量比为1∶1，并且在氨基酸序列上的同源性非常高[Peeters，B.，Heyns，W.，Bossyns，D.，and Rombauts，W.(1983)J.Biol.Chem.258，14206-14211]。脯氨酸富含多肽的生物合成受到荷尔蒙严格调节，相应基因的转录为分析荷尔蒙调节的基因表达机制提供了有趣的模板[Heyns，W.，Bossyns，D.，Peeters，B，and Rombauts，W.(1982)J.Biol.Chem.257，7407-7413]。脯氨酸富含多肽的前体蛋白分子量大约为637kDa，经过水解变为一系列相似的38个氨基酸残基的脯氨酸富含多肽[Hemschoote，K.，Peeters，B.，Dirckx，L.，Claessens，F.，De                             Clercq.etal.，(1988)J.Biol.Chem.263，19159-19165]。酸性脯氨酸富含多肽前体由一个单拷贝基因的一个大外显子编码，蛋白质由5761个氨基酸残基组成，包括一个信号肽和三个大的结构域(结构域A、B、C)。这三个大结构域脯氨酸含量相当高(11-15％)。其中，结构域A(928个氨基酸残基)是唯一的并且包含几个小的酸性氨基酸簇。结构域B(830个氨基酸残基)则有7个连续的重复子，其中四个重复子的序列非常不同。结构域C(3914个氨基酸残基)有39个单元，其中只有8个退化，并且是连续的重复子。三个结构域中有100个氨基酸序列在结构上非常相似(76-92％)，并且都包含了所有的脯氨酸富含多肽由特异性水解产生的变体。脯氨酸富含多肽基因组区域包括5097个碱基对，在翻译起始位点的5’上游区域有几个转录的调控因子。一个可能的Sp1因子(GGGCGG)结合位点是位于一个起始基元附近的47个核苷酸，其余大多数启动子元素则位于ATG密码子附近[Norbert De Clercq，Katrien Hemschoote，Ann Devos，et al.，(1992)J.Biol.Chem.267，9884-9894]。

本发明人的多肽与脯氨酸富含多肽在氨基酸水平上分别有34％的相同性和51％的相似性，并具有相似的结构特征，同属于脯氨酸富含多肽家族，故命名为脯氨酸富含蛋白86.90，同时推测其具有相似的结构特征。

由于如上所述脯氨酸富含蛋白86.90蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的脯氨酸富含蛋白86.90蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新脯氨酸富含蛋白86.90蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——脯氨酸富含蛋白86.90以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码脯氨酸富含蛋白86.90的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码脯氨酸富含蛋白86.90的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产脯氨酸富含蛋白86.90的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——脯氨酸富含蛋白86.90的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——脯氨酸富含蛋白86.90的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与脯氨酸富含蛋白86.90异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；