[发明专利]一种新的多肽——泛激素特异性蛋白酶23.10和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——泛激素特异性蛋白酶23.10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

泛激素特异性蛋白酶(ubiquitin-specific proteases，UBPs)是一组泛激素途径中所必需的酶。UBPs剪切泛激素的C端，它的底物有两种。一种为α-氨基酸联接中的泛激素，它在主要的泛激素翻译产物，聚泛激素和泛激素-核糖体融合蛋白中发现；另一种为ε-氨基酸联接中的泛激素，它在与细胞内蛋白不结合或结合在一起的多泛激素链中发现。

Arabidopsis thaliana中的两个基因AtUBP3和AtUBP4所编码的UBPs具有93％的同源性，它们是这一亚家族中仅有的两个成员，是迄今为止发现的最小的UBPs。AtUBP3和AtUBP4具有UBPs的所有保守氨基酸区域，包括一个半胱氨酸活性位点，一个组氨酸活性位点和两个其它的相似区域。它们被推测存在与细胞核中，由于两者均具有双向和类SV40核酸定位信号。双向和类SV40核酸定位信号在许多植物核蛋白中保守存在。AtUBP3和AtUBP4存在于核酸提取物中。

大肠杆菌体内试验显示，UBP与一个推测的底物表现出共现性，AtUBP3和AtUBP4可特异性地将人工底物Ub-X-β-gal降泛激素化，但不能与天然α-氨基酸联接的泛激素融合物阿布属Ub-CEP52和聚泛激素相作用。AtUBP3和AtUBP4在不同的组织和发育阶段中广泛存在，(J.S.Chandler，et.al，Mol Gen Genet，1997，255：302-310)

本发明的人的基因与泛激素特异性蛋白酶基因AtUBP3在蛋白水平上有58％的同一性和70％的相似性。且两者均含有泛激素特异性蛋白酶家族的特征性结构域。基于以上各点，故认为本发明的新基因为泛激素特异性蛋白酶基因，命名为{泛激素特异性蛋白酶23.10}。并以此推断其与AtUBP3相似，同为泛激素特异性蛋白酶家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述泛激素特异性蛋白酶23.10蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的泛激素特异性蛋白酶23.10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新泛激素特异性蛋白酶23.10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——泛激素特异性蛋白酶23.10以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码泛激素特异性蛋白酶23.10的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码泛激素特异性蛋白酶23.10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产泛激素特异性蛋白酶23.10的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——泛激素特异性蛋白酶23.10的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——泛激素特异性蛋白酶23.10的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与泛激素特异性蛋白酶23.10异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中106-738位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1753位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。